鸡贫血病毒是鸡传染性贫血的病原，对雏鸡能造成骨髓造血组织及胸腺等淋巴组织萎缩，引起贫血；对成年鸡能造成严重的暂时性免疫抑制。在CAV编码的三种蛋白中，VP1是结构蛋白，也是游离CAV粒子中存在的唯一蛋白组分；VP2是VP1的伴侣蛋白或骨架蛋白，辅助VP1组装成病毒衣壳。 据报道用共表达CAV VP1和VP2的杆状病毒裂解物免疫鸡可使其产生CAV中和抗体，但其表达量很低，不能适应生产中大规模使用的需要。如果大肠杆菌中表达的VP1和VP2融合蛋白也能形成中和抗原表位，则解决了这个问题。是否真能如此呢?本研究就是对其作一些前期研究，进行了VP1和VP2融合基因的克隆和表达。 本研究利用PCR扩增了CAV的VP1和VP2基因并进行了克隆测序，同时利用分子生物学软件对这两个基因进行了分析。然后将VP1基因分段克隆至原核表达载体pGEX-4T-1，经酶切及PCR鉴定，证明成功构建了重组表达载体pGEX-A、pGEX-B、pGEX-C。然后将VP2基因插入VP1重组表达载体，构建成功VP1和VP2的重组融合表达载体pGEX-D、pGEX-E、pGEX-F。 在1mmol／L的IPTG诱导下，融合蛋白在大肠杆菌BL21中以包涵体的形式得到大量表达。融合蛋白D、E、F的分子量分别为95kD、80kD、66kD。在Western-blot免疫印迹分析中，3个融合蛋白与CAV阳性血清均能发生特异性反应，表明它们都具有良好的反应性。多次洗涤包涵体后，用含1％SDS的溶解液溶解包涵体。然后用电洗脱方法对融合蛋白进行了纯化，获得了理想的纯化结果。 重组蛋白在低浓度下梯度透析复性后，用ELISA方法检测纯化的3个融合蛋白的反应性，结果只有F重组融合蛋白能同CAV阳性血清发生特异性结合，显示了很好的结果，可以用于检测试剂盒的调试或其免疫原性的后继试验。