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第一部分:腺病毒介导鼠胰岛素样生长因子1基因对胰岛β细胞损害的保护性研究:体内试验目的研究腺病毒介导鼠胰岛素样生长因子-1(rIGF-1)基因在链脲佐菌素(STZ)诱导的胰岛β细胞损害中的保护作用。方法构建携有rIGF-1基因的重组腺病毒并感染RINm5F细胞,ELISA和Western blot检测rIGF-1表达;STZ诱导细胞破坏,检测培养上清中NO水平,胰岛素释放实验进行功能测定,流式细胞仪检测细胞凋亡,四甲基偶氮唑盐法检测细胞存活率。结果成功构建重组腺病毒,病毒滴度为4.0×10~8pfu/ml。rIGF-1在细胞内外有效表达,并具有抑制STZ诱导胰岛β细胞凋亡和一氧化氮(NO)产生、保护β细胞胰岛素分泌功能和促进细胞增殖的作用。结论胰岛β细胞局部表达IGF-1能够保护细胞功能,抑制NO产生,使胰岛β细胞免受诱导凋亡因子的损害,提高细胞存活率,具有潜在的防治1型糖尿病的作用。STZ诱导胰岛β细胞凋亡可能与NO介导有关。第二部分:腺病毒介导胰岛素样生长因子1基因对胰岛β细胞损害的保护性研究:初步体内实验目的:研究腺病毒介导胰岛素样生长因子1基因对环磷酰胺诱导的非肥胖性糖尿病小鼠Ⅰ型糖尿病的预防作用。方法:4周龄雌性NOD小鼠24只,随机分为①正常对照组,②Ad-IGF-1组,③Ad-eGFP组,每组各8只。②③分别腹腔注射(ip)含Ad-IGF-1和Ad-eGFP的重组腺病毒液0.1ml,①组给与等量生理盐水。用药一周后三组均给予环磷酰胺300mg/kg i.p.一次(用生理盐水临时配制),以促发糖尿病。所有小鼠从4周龄开始每周测定体重,血糖,确诊糖尿病或CP注射后第30天断颈处死,处死前均测血糖。小鼠死后立即取出胰腺,液氮冷冻备做免疫组化,并于实验结束时每组各留取3只未发病鼠部分胰腺判定胰岛炎严重程度。结果:1腺病毒介导IGF-1组小鼠体重较①和③组高,差别有统计学意义。2,血糖水平,糖尿病发病率,胰腺炎的严重程度,各组之间的差别无统计学意义。3,胰腺组织IGF-1含量差异各组间无显著性。结论:未观察到腺病毒介导IGF-1基因对非肥胖性糖尿病小鼠糖尿病的预防作用。