目的：　　急性淋巴细胞性白血病(ALL)是淋巴干/祖细胞丧失分化能力而停滞于某一阶段并无限增殖所致的恶性克隆性疾病。随着白血病化疗水平的提高、靶向药物问世和造血干细胞移植的进展，白血病的长期生存有了明显提高，然而仍有近50％患者会复发，主要原因是体内仍残留白血病细胞，称为微小残留病(MRD)。因此微小残留病(MRD)成为研究热点以及治愈白血病关键。目前检测MRD主要有流式细胞仪检测细胞表面抗原以及更为敏感的PCR方法。由于大多数ALL缺乏特异性强、且适合于所有患者的融合基因，并且几乎所有ALL均存在的特异性的、个体化的免疫球蛋白轻、重链或T细胞受体基因重排，这种特异性的基因重排就成了PCR方法检测MRD的主要靶点。目前国际上成功应用该技术检测MRD用于指导ALL临床治疗，并指出MRD水平的变化有助于区分高、低危ALL，并进行分层治疗，取得很好疗效。国内仅上海、苏州等个别医院开展了此项技术，东北地区医院尚未开展此项技术，因此本研究通过欧洲BIOMED-2检测系统，采用多重PCR技术、Touch down PCR、克隆、DNA测序等技术，检测B细胞ALL患者白血病细胞免疫球蛋白基因克隆性重排，设计针对每一个个体的特异性引物并在白血病初诊阶段以及缓解时期实施白血病细胞的监测，将有效指导病人的个体化治疗。　　方法：　　1、研究对象　　在取得患者知情同意后，选取中国医科大学附属第一医院血液科经过流式细胞仪确定的B系淋巴细胞白血病患者骨髓11例，3例女性，8例男性，最大年龄53岁，最小年龄30岁，中位数年龄39岁。　　2、DNA提取　　采用冻存的骨髓单个核细胞（bone marrow mononuclear cells，BMMNCs）标本约5×106/L，用DNA提取试剂盒按操作说明从标本中提取DNA，溶于30μl无核酸水中，-20度冰箱保存备用。　　3、PCR扩增　　应用欧洲BIOMED-2引物系统对11例DNA模板进行扩增，并且优化了PCR反应体系，采用了Touch down PCR技术，提高了检测的灵敏度。　　4、克隆　　扩增出的VH1-7基因约80-400 bp，其中＜150bp产物切胶纯化后插入克隆载体pMDTM18-T Simple Vector，转入化学感受态菌DH5a，挑选阳性克隆扩大培养，然后提取质粒DNA，并将鉴定正确的质粒进行双脱氧终止法测序。　　5、序列分析　　应用congress软件对序列进行链接，并与PMD18基因序列进行比对，找到PMD18的A尾、T尾，筛选链接的目的基因进行BLAST搜索。目的基因与14q32、2P11.2相吻合。　　6、设计引物　　获取特异性重排序列与生殖细胞DNA序列比对，确定重组DNA序列，然后设计特异性引物。　　结果：　　1、获取了8例ALL-MRD患者的IgH基因重排序列，4例患者IgK重排序列。　　2、设计为1例IgH基因重排阳性患者设计特异性引物，成功扩增出目的基因。　　结论：　　一、首次对我国东北地区急性B淋巴细胞白血病患者进行个体化基因检测。　　二、为1例IgH基因重排阳性患者设计特异性引物，成功扩增出目的基因，而其它患者白血病细胞以及正常人外周血淋巴细胞检测阴性，提示急性B淋巴细胞白血病个体化检测成功。　　三、对BIOMED-2反应体系的PCR条件进行了优化，为急性B淋巴细胞白血病微小残留病的个体化检测及日后的个体化基因诊断及治疗奠定了基础。