【摘 要】
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[目的] 用基因工程方法构建BALB/c鼠血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/flk-1)胞外段的重组质粒pcDNA3.1(+)-flk1-domain1-7,对目的基因蛋白质的表达进行鉴定,构建成抗肿瘤血管
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[目的] 用基因工程方法构建BALB/c鼠血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/flk-1)胞外段的重组质粒pcDNA3.1(+)-flk1-domain1-7,对目的基因蛋白质的表达进行鉴定,构建成抗肿瘤血管生成核酸疫苗。[方法] 应用RT—PCR技术从BALB/c胎鼠扩增出flk-1胞外段,重组于真核表达载体pcDNA3.1(+),构建成重组质粒pcDNA3.1(+)-flk1-domainl-7;以脂质体法将pcDNA3.1(+)-flk1-domainl-7转染COS7细胞,用Western blot方法对目的基因蛋白质的表达进行鉴定。[结果] (1) 成功地从BALB/c胎鼠组织中克隆出2286bp的VEGFR-2胞外段cDNA全长,测序证实所获基因序列与GeneBank公布的鼠血管内皮生长因子受体2胞外段序列一致;(2) 成功地构建了重组质粒pcDNA3.1(+)-flk1-domainl-7,且目的基因在真核表达系统中得到了表达,构建成了抗肿瘤血管生成核酸疫苗pcDNA3.1(+)-flk1-domain1-7。[结论] 成功地构建了抗肿瘤血管生成核酸疫苗pcDNA3.1(+)-flk1-domainl-7,为进一步的抗肿瘤新生血管生成研究打下了基础。
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