桂枝不同萃取部位抗过敏作用的筛选及其作用机制研究

来源 :成都中医药大学 | 被引量 : 8次 | 上传用户:jackyong63
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目的:针对解表药桂枝“发汗解肌”的功能主治,及其抗过敏作用的研究现状,本研究主要采用有机溶剂萃取方法制备桂枝不同萃取部位,采用体内与体外实验相结合研究方式,探讨桂枝抗过敏作用的有效物质部位,并从Th1/Th2失衡、肥大细胞脱颗粒及IgE释放角度阐释其作用机制,以期为桂枝作为“发散风寒”中药用于治疗过敏性疾病的应用提供现代药理学依据。方法:①采用DNCB诱发的小鼠迟发型超敏反应模型及小鼠异种被动皮肤过敏反应模型,观察桂枝不同萃取部位对模型动物毛细血管通透性、耳肿胀度的影响,结合体外透明质酸酶抑制实验,以初步筛选桂枝抗过敏作用的有效萃取部位。②采用组胺、5-羟色胺所致小鼠皮肤毛细血管通透性增高模型和卵白蛋白所致豚鼠支气管哮喘模型,进一步明确桂枝去油水煎液、乙酸乙酯萃取部位的抗过敏效庆。③测定支气管哮喘模型豚鼠血清IFN-γ、IL-4、IgE的含量,及肺泡灌洗液中IFN-γ、IL-4、IL-18、总蛋白水平,并观察含药血清体外对大鼠腹腔肥大细胞8-氨基己糖昔酶与组胺释放率的影响,探讨桂枝抗过敏作用有效部位的作用机制。④通过理化反应初步探讨桂枝抗过敏作用有效萃取部位的大类物质成分。结果:①桂枝去油水煎液6g/kg、桂枝乙酸乙酯萃取部位6g/kg、水提部位6g/kg连续给药10d,能显著降低迟发型过敏反应模型小鼠的毛细血管通透性(P<0.01或P<0.05),乙酸乙酯萃取部位亦能明显抑制该模型小鼠的耳廓肿胀度(P<0.05 );三者灌胃.给药7d,对小鼠异种被动皮肤过敏反应的血管通透性有明显抑制作用(P<0.05或P<0.01)。桂枝去油水煎液与桂枝乙酸乙酯萃取部位体外对透明质酸酶有较强的抑制作用,抑制率分别为52.48%、52.17%。②桂枝去油水煎液6g/kg、桂枝乙酸乙酯萃取部位6g/kg灌胃给药7d,对组胺、5-HT所致小鼠毛细血管通透性的增加有显著抑制作用(P<0.01,P<0.05);桂枝乙酸乙酯萃取部位1.665、3.33g/kg及桂枝去油水煎液1.665g/kg灌胃给药7d,显著降低支气管哮喘模型豚鼠全血白细胞计数,减轻豚鼠肺组织中嗜酸性粒细胞浸润,并对肺组织中支气管管腔内细胞碎片、上皮细胞脱落及炎细胞浸润表现出不同程度的减轻趋势,亦能降低模型动物肺泡灌洗液中总蛋白含量。③桂枝乙酸乙酯萃取部位1.665、3.33g/kg及桂枝去油水煎液1.665g/kg灌胃给药7d,能不同程度地升高支气管哮喘模型豚鼠肺泡灌洗液与血清中IFN-7水平,降低IL-4含量,并能升高肺泡灌洗液中IL-18含量(P<0.01),降低血清IgE含量(P<0.01)。桂枝乙酸乙酯萃取部位含药血清、桂枝去油水煎液含药血清体外均能不同程度地抑制大鼠腹腔肥大细胞8-氨基己糖苷酶、组胺的释放,显示出抑制肥大细胞脱颗粒作用。结论:桂枝抗过敏作用的有效萃取部位是桂枝乙酸乙酯萃取部位、桂枝去油水煎液,提示水溶性成分起主导作用。其抗过敏作用的发挥是多途径的,与其抑制IL-4细胞因子释放,促进IFN-γ、IL-18细胞因子释放,从而纠正失衡的Th1/Th2细胞亚群,抑制肥大细胞脱颗粒过程而减少过敏介质的释放,抑制IgE的生成及减轻嗜酸性粒细胞的浸润等作用相关。
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