【摘 要】
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目的:观察银杏内酯A B(Ginkgolide AB, GKAB; Ginkgolide A : Ginkgolide B =1:1)静脉注射对大鼠永久性局灶性脑缺血的保护作用及其对NF-κB信号转导通路的抑制作用。方法:采
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目的:观察银杏内酯A B(Ginkgolide AB, GKAB; Ginkgolide A : Ginkgolide B =1:1)静脉注射对大鼠永久性局灶性脑缺血的保护作用及其对NF-κB信号转导通路的抑制作用。方法:采用大鼠永久性大脑中动脉阻塞(permanent middle cerebral artery occlusion, pMCAO)模型观察GKAB 12.5、25、50mg/kg对脑梗塞体积、脑水肿、行为学症状及组织形态学(光镜)的影响,大鼠脑缺血后10 min静脉注射GKAB。应用免疫组织化学法分析NF-κB的核转位;采用Western-blot法检测大鼠大脑皮层NF-κB, IκBα, p-IKKα蛋白含量及大鼠大脑皮层、纹状体和海马NIK蛋白含量;采用RT-PCR技术检测NF-κB靶基因c-Myc mRNA的表达。结果:GKAB 12.5、25、50mg/kg静脉注射呈剂量依赖性减少pMCAO大鼠脑梗死体积,降低脑含水量和改善行为学症状,减轻脑组织形态变化(P <0.05, P <0.01)。Western-blot显示:大鼠pMCAO后12小时大脑皮层缺血区NF-κB的含量显著增加(P <0.01),GKAB 12.5、25、50mg/kg能显著降低NF-κB的含量(P <0.01);大鼠pMCAO后6小时大脑皮层缺血区NF-κB的抑制蛋白IκBα水平显著减少(P <0.01),GKAB 25、50mg/kg能显著增加IκBα水平(P <0.05, P <0.01);大鼠pMCAO后3小时大脑皮层缺血区p-IKKα的水平显著增加(P <0.01),GKAB 12.5、25、50mg/kg能明显降低p-IKKα的表达量(P <0.01)。Western-blot结果亦证明:缺血后3小时大鼠大脑皮层缺血区p-NIK的水平明显增加(P <0.05),随后下降;缺血侧纹状体p-NIK蛋白水平于缺血12小时及24小时明显增加(P <0.05);而缺血侧海马p-NIK蛋白水平在缺血后各时间点均无明显变化。GKAB 50mg/kg能明显降低缺血后3小时大鼠大脑皮层缺血区p-NIK的水平(P <0.05)。免疫组化证明:假手术组大鼠大脑皮层NF-κB主要表达在神经细胞胞浆中;pMCAO后12小时,模型组大鼠大脑皮层NF-κB主要表达于神经细胞胞核,说明缺血使NF-κB从细胞浆移位至细胞核;
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