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[研究背景及目的]炎性疼痛普遍存在于临床情况中,也是困扰患者的主要慢性疼痛类型。机制研究发现,小胶质细胞及其分泌的促炎症因子参与炎性疼痛的发生与长期维持。而近年来的研究揭示,miR-146a对炎症反应有负向调节作用,且很可能也参与了疼痛机制。本研究的目的是希望通过人为干预,在体外和体内实验中,高表达miR-146a,验证它能否减少小胶质细胞激活后及大鼠炎性疼痛模型中脊髓的促炎症因子表达,并能否缓解大鼠炎性疼痛。[研究方法]体外——PCR法检测细菌脂多糖(LPS)刺激小胶质细胞株(BV2细胞)后的miR-146a表达水平；在miR-146a模拟物转染BV2细胞后,采用ELISA法检测细胞上清液中的TNFa和IL-6表达情况；同时分别采用PCR和western-blot检测细胞中IRAK1和TRAF6的基因和蛋白表达情况。体内——采用完全氟氏佐剂(CFA)制备大鼠慢性炎性疼痛模型,鞘内注射miR-146a模拟物进行中枢神经系统内转染；采用机械和热痛刺激进行疼痛行为学检测；提取腰段脊髓RNA,采用实时荧光定量PCR检测中枢神经系统内miR-146a、TLR4、IRAK1、TRAF6、TNFa和IL-6表达变化。[研究结果]体外——与正常组或阴性对照组比较,采用10nM、50nM、100nM三个转染浓度对BV2细胞进行miR-146a模拟物转染,均可明显增加细胞内miR-146a含量；其中以50nM转染浓度效率最佳；LPS刺激导致BV2细胞激活,可以明显增加细胞内IRAK1和TRAF6表达,也可以明显诱发细胞分泌更多的TNFa和IL-6;用miR-146a模拟物转染可以明显降低TNFa和IL-6的表达水平,同时明显降低细胞内TRAF6,而非IRAK1的表达。体内——在CFA诱发的大鼠炎性疼痛中,miR-146a出现异常表达,在CFA注射后第1天有所降低,在第3天显著升高,第7天有所回落,但仍然显著高于对照组；而中枢神经系统内的TLR4、IRAK1、 TRAF6、TNFa和IL-6随着时间逐渐升高；鞘内注射miR-146a模拟物可以明显缓解大鼠的疼痛,其机械缩足阈值和热缩足潜伏期均有所回升；PCR分析证实miR-146a模拟物鞘内注射可以显著增加脊髓内miR-146a含量,同时可以降低促炎症因子TNFa口IL-6的表达水平,并且TLR4信号通路上的IRAK1和TRAF6分子的表达亦有明显降低。[研究结论]1) miR-146a模拟物的体外和体内转染,都可以有效提高细胞或组织内的miR-146a含量；2) miR-146a可以减少LPS导致的BV2细胞促炎症因子分泌,并且该作用可能是通过负反馈调节TLR4信号通路上的TRAF6分子而进行；3)miR-146a可以减轻CFA诱导的大鼠炎性疼痛,很有可能参与了慢性疼痛的发展、维持及调节。