拟南芥NHX5和NHX6调节生长素转运蛋白PIN6的功能研究

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植物Na~+/H~+反向交换体(NHX)在植物生长发育过程中起着重要的作用。研究发现,拟南芥内膜Na~+/H~+反向交换体At NHX5和At NHX6具有调节植物生长发育的功能。然而,关于At NHX5和At NHX6调节植物生长发育的分子机制还很不清楚。生长素(auxin)是调控植物生长发育的关键植物激素。生长素需要通过转运蛋白将其运输到特定的细胞或组织。PIN6是定位在内质网和质膜的生长素转运蛋白,它在调节细胞生长素平衡以及植物生长发育方面起着重要的作用。本文的研究目的是分析At NHX5和At NHX6是否通过调控PIN6的功能而调节细胞生长素的水平,从而调节植物的生长发育过程。我们构建了PIN6过表达植株并分析了其生长表型。主要结果如下:1.我们首先制备PIN6过表达植株。将UBQ10::PIN6(Col-0)株系分别与nhx5、nhx6单突变体和nhx5 nhx6双突变体杂交,制备UBQ10::PIN6(nhx5)、UBQ10::PIN6(nhx6)及UBQ10::PIN6(nhx5 nhx6)纯合体植株。2.RT-PCR分析发现,PIN6基因在nhx5、nhx6和nhx5 nhx6的表达水平与野生型一样,表明PIN6基因的表达不受At NHX5和At NHX6的调节。然而,PIN6-GFP在nhx5、nhx6和nhx5 nhx6的叶脉分布的荧光减弱,表明At NHX5和At NHX6调节PIN6在叶脉的分布。3.PIN6/nhx5 nhx6过表达植株矮小,莲座和子叶夹角小,叶片叶绿素含量增加;角果少且短,种子败育,种子产量降低;花小,雄蕊发育异常率高,表明At NHX5和At NHX6具有调节PIN6功能的作用。总之,我们的研究表明,At NHX5和At NHX6具有调节PIN6的作用;At NHX5和At NHX6可能通过调控PIN6的功能而调节细胞生长素的水平,从而调节植物的生长发育过程。
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