蝗绿僵菌转录因子MaSom1的功能研究

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蝗绿僵菌是一种重要的昆虫病原真菌,明确其侵染致病的分子机制具有十分重要的意义。Flo8/Som1是位于cAMP/PKA信号通路下游的转录因子,对部分丝状真菌的孢子形成和致病性有重要作用,但在昆虫病原真菌中关于Som1的功能研究还未见报道。本文以昆虫病原真菌模式生物蝗绿僵菌为研究对象,阐明了MaSom1在其产孢、抗逆和侵染致病过程中的功能和机制。主要研究结果如下:1.MaSom1主要定位于蝗绿僵菌细胞核。无论是在孢子中还是在菌丝中MaSom1均可定位于细胞核。2.MaSom1缺失后,蝗绿僵菌孢子在1/4SDAY上萌发速率减慢,萌发中时延长4.5小时,产孢量约降低为WT的40%。3.MaSom1缺失后,蝗绿僵菌的湿热和紫外耐受性降低。4.MaSom1缺失后,蝗绿僵菌孢子细胞壁完整性和表面结构改变。ΔMaSom1中真菌细胞壁合成相关基因下调表达,几丁质的着色率约为WT的1.88倍,α-1,3-葡聚糖呈聚集的颗粒状分布,孢子表面β-1,3-葡聚糖分布增加。5.以体表点滴和体内注射两种接种方式进行生物测定发现,MaSom1缺失后蝗绿僵菌的毒力均显著降低。6.MaSom1缺失后,影响蝗绿僵菌在蝗虫体外血淋巴中生长和对东亚飞蝗体壁的穿透。ΔMaSom1在蝗虫体外血淋巴中生长减弱,在东亚飞蝗后翅上萌发减慢,附着胞形态改变,形成率约降低为WT的45.7%。7.MaSom1缺失后,蝗虫免疫反应增强,Toll通路免疫相关基因上调表达,胞外酚氧化物酶(PO)活性增加,体壁内侧节结数增加。实验结果表明:由于MaSom1缺失后分生孢子萌发和附着胞形成受损,虫菌体在寄主血淋巴中的生长减弱,分生孢子表面结构变化引起寄主昆虫免疫应答增强,从而导致ΔMaSom1的毒力下降。另外,敲除MaSom1也使得蝗绿僵菌的湿热和紫外逆境耐受性降低。
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