不同浓度的蔗糖及木糖醇对血链球菌与变形链球菌相互作用的影响

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血链球菌(Streptococcus sanguis,S.sanguis)是最早定居牙面的口腔常驻细菌之一,在牙菌斑形成的早期阶段及菌群平衡中起着重要作用,其与变形链球菌(Streptococcus mutans,S.mutans)之间的相互竞争与拮抗在菌斑形成和发展中具有重要意义。S.sanguis的拮抗机制在于其产生的过氧化氢发挥的非特异性抑菌作用。碳水化合物的不同可影响细菌的代谢,其中蔗糖具有较强的致龋能力,木糖醇则不利于致龋性能的发挥,蔗糖与木糖醇的应用对S.sanguis的生长、产酸及产生过氧化氢的能力有何影响,以及其进一步影响血链球菌与变形链球菌相互作用的结果尚不明确。本实验假设不同浓度的蔗糖与木糖醇可以影响血链球菌产生过氧化氢的能力并进一步影响血链球菌与变形链球菌的相互作用。目的:1.研究不同浓度蔗糖及木糖醇对S.sanguis、S.mutans生长、产酸的影响;2.研究不同浓度蔗糖及木糖醇对S.sanguis产生过氧化氢的能力影响;3.了解不同浓度的过氧化氢对S.mutans生长的抑制作用;4.进一步研究在不同浓度蔗糖及木糖醇培养基中S.sanguis与S.mutans相互作用的不同。方法:1.选用S.sanguis ATCC10556,S.mutans UA159为实验菌株,运用比浊法测定不同浓度蔗糖及木糖醇对S.sanguis、S.mutans生长的影响;使用p H计测定培养物的p H值,记录并计算Δp H,测定不同浓度蔗糖及木糖醇对S.sanguis、S.mutans产酸的影响;2.运用邻联茴香胺-辣根过氧化物酶法测定有氧环境中不同浓度蔗糖及木糖醇对S.sanguis产生过氧化氢的量;3.运用比浊法测定不同浓度过氧化氢对S.mutans生长的影响;4.通过平板培养法观察有氧、厌氧环境中不同浓度蔗糖及木糖醇对S.sanguis与S.mutans相互作用的影响。结果:1.S.sanguis与S.mutans在有氧、厌氧环境中均能良好生长,其中生长能力BHI+50mmol/L蔗糖>BHI+5mmol/L蔗糖>BHI>BHI+5mmol/L木糖醇>BHI+50mmol/L木糖醇;S.mutans,S.sanguis培养上清液p H值随着培养时间的增加而减小,细菌的生长和代谢产酸存在一致性,细菌生长状况越好、上清液p H值越小、代谢产酸越多。2.在有氧环境中,S.sanguis在5组培养基中培养6h累积产生的过氧化氢的量BHI+50mmol/L蔗糖>BHI+5mmol/L蔗糖>BHI>BHI+5mmol/L木糖醇>BHI+50mmol/L木糖醇(P<0.05)。以6h时菌悬液600nm处的吸光度值标准化之后,BHI>BHI+5mmol/L蔗糖>BHI+50mmol/L蔗糖>BHI+5mmol/L木糖醇>BHI+50mmol/L木糖醇(P<0.05)。3.0.05mmol/L的过氧化氢即可对S.mutans的生长产生轻微抑制作用,且随着过氧化氢浓度的逐渐增高抑制作用逐渐增强,其中在含1.5mmol/L过氧化氢的培养基中,细菌的生长几乎完全被抑制。4.同时接种两种细菌有氧、厌氧环境均未观察到相互抑制的作用。先接种S.mutans,对S.sanguis的抑制作用在50mmol/L蔗糖中最为明显,同种培养基中厌氧条件下的抑制作用强于有氧条件。先接种S.sanguis,对S.mutans的抑制作用在50mmol/L蔗糖中最为明显,同种培养基中有氧条件下的抑制作用强于厌氧条件。结论:不同浓度的蔗糖及木糖醇可以影响细菌的生长、产酸;S.sanguis在不同浓度的蔗糖及木糖醇培养基中产生过氧化氢的能力不同;不同浓度的过氧化氢对S.mutans生长的抑制作用不同;S.sanguis与S.mutans的相互作用亦受到糖的种类、浓度及环境中氧的影响,在有氧、50mmol/L蔗糖条件下S.sanguis抑制S.mutans的能力最强,在厌氧、50mmol/L蔗糖条件下S.mutans抑制S.sanguis的能力最强。
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