中医药是中华民族文化的瑰宝。中药复方又称为方剂，方剂是在辨证审因、决定治法之后，选择适宜的药物，按着一定的组方原则，酌定用量、用法，妥善配伍而成的。方剂是中医用药的主要形式，配伍是中医用药的优势与特色所在。“药有个性之特长，方有合群之妙用”，几千年来，历代医家在长期的医疗实践中总结了完整的遣药组方理论，中药复方在人类与疾病作斗争的过程中，充分展示了其安全有效、防病治病的作用。我国人民长期的医疗实践证明：中药复方的综合效能优于单味药。方剂配伍理论始于《黄帝内经》，经过汉、唐、宋、元、明、清及当代研究，形成了较为系统的理论和方法。最有代表性的是关于药物协同或制约的“七情和合”，“七情合和”被视为配伍理论之总纲，“君臣佐使”成为方剂组成的原则，对后世影响深远。方剂配伍不是药物的简单堆砌，它体现了丰富的制方学理和蕴涵着临证组方的客观规律。中药配伍理论具有深奥的科学内涵，运用现代科学技术、现代实验手段对方剂配伍规律进行研究，具有深刻的意义：可进一步揭示方剂配伍的客观规律与科学内涵，阐明方剂防治疾病的物质基础与作用机理，在更广的范围、更深的层次展现中医治疗疾病的科学原理；对于创制优质高效、成分清楚、作用机制明确的中药新制剂具有重要指导作用；可促进中医理论的发展，推动中医药走向世界。对于方剂配伍规律的现代实验研究，主要有两种方法。其一是用药理研究方法，观察方剂配伍与药理效应变化之间的关系，通过配伍前后药理效应的变化探讨配伍的意义；其二是用化学研究方法，观察方剂配伍与化学成分变化间的关系，从配伍前后体内、体外物质基础的变化探讨方剂的配伍内涵。麻黄汤为医圣张仲景名方，出自《伤寒论》，由麻黄、桂枝、苦杏仁、甘草组成。有发汗解表，宣肺平喘之功效，原用于太阳伤寒表实证（或称外感风寒表实证），现代主要用于上呼吸道感染、流感、急性支气管炎、支气管哮喘等。麻黄汤药味不多，组方简明，配伍精当，是历代中医学家倍为推崇的著名方剂，也是各版教材用以阐明方剂组成原则的首选方剂。按中医组方理论分析，方中君臣佐使皆备：麻黄为君药；桂枝为臣药；杏仁为佐药；甘草为使药，蕴含着深奥的组方原理。选用此方研究方剂配伍规律具有一定的代表意义。对于麻黄汤全方的研究，主要集中在药理方面。全方化学方面的研究较少。对于其由于配伍因素引起的体外化学成分的变化则只有本课题组的研究论文：课题组其他成员分别研究了配伍对君药麻黄的有效成分麻黄碱与伪麻黄碱煎出量的影响和配伍对臣药桂枝有效成分桂皮醛含量的影响。配伍对麻黄汤中佐药杏仁、使药甘草主要效应成分的影响未见文献报道。本文应用化学研究方法，以麻黄汤为代表方，通过对麻黄汤的拆方研究，观察配伍变化与佐、使药化学成份变化之间的关系，探讨配伍合煎后苦杏仁苷、甘草酸及甘草指纹图谱的变化规律，从配伍前后佐药、使药主要成分变化的层面上阐述麻黄汤配伍规律，以期从物质基础的角度为方剂配伍规律提供合理的解释，并为继续深入研究麻黄汤的组方原理打下基础。目的：（1）建立苦杏仁药材中苦杏仁苷含量测定方法，选择合适的苦杏仁药材供本课题研究。（2）建立麻黄汤中佐药苦杏仁的有效成分苦杏仁苷的含量测定方法，研究麻黄汤不同配伍对苦杏仁苷煎出量的影响。（3）建立麻黄汤中使药甘草的有效成分甘草酸的含量测定方法，研究麻黄汤不同配伍对甘草酸煎出量的影响。（4）建立甘草药材指纹图谱和麻黄汤中甘草指纹图谱，研究麻黄汤不同配伍对甘草指纹图谱主要共有指纹峰峰面积的影响。方法：（1）采用传统的中药水煎方法，用正交设计对麻黄汤进行拆方分组，制备麻黄汤各配伍组合水煎液。水煎液样品经简单的醇沉处理后制备供试液。（2）应用HPLC-ELSD法测定苦杏仁药材中苦杏仁苷，色谱柱为Hypersil-ODS（4.0mm×250mm，5μm）；流动相为甲醇-水（30：70），流速0.5mL·min^-1；柱温25℃；ELSD检测器，漂移管温度：98℃，载气流速：3.2 L·min^-1；（3）应用反相高效液相色谱法测定麻黄汤各配伍组合水煎液中苦杏仁苷的含量。色谱柱为Hypersil ODS柱（4.0×250mm，5μm）；流动相：甲醇-水（15：85），流速为0.5 mL·min^-1；柱温：35℃；紫外检测器，检测波长：210nm；（4）应用反相高效液相色谱法测定麻黄汤各配伍组合煎液中甘草酸的含量。色谱柱为Zorbax SB-C₁₈柱（4.6×250mm，5μm）；流动相：乙腈-1.5％醋酸水溶液梯度洗脱，流速为0.8 mL·min^-1，梯度洗脱程序为：0～30min，乙腈的体积分数由23％线性增至45％，30～35min，乙腈的体积分数由45％线性增至60％；柱温：室温；DAD检测器，检测波长：254nm；（5）建立甘草药材和麻黄汤各配伍组合水煎液中甘草的HPLC指纹图谱。选用Zorbax SB-C₁₈（4.6×250mm，5μm）色谱柱；流动相：乙腈-1.2％醋酸水溶液梯度洗脱，流速为0.6 mL·min^-1，梯度洗脱程序为：0至70min，乙腈的体积分数由4％升至65％；分析时间70min；柱温：室温；DAD检测器，检测波长：254nm。（6）应用SPSS 13.0统计分析软件对甘草酸、苦杏仁苷测定结果进行统计分析。结果：（1）建立了苦杏仁药材中苦杏仁苷的HPLC-ELSD定量测定方法。苦杏仁苷在1.0～15.1μg间与峰面积线性关系良好，r=0.99999；平均回收率为99.0％，RSD为2.9％（n=5）。（2）建立了麻黄汤中苦杏仁苷的HPLC定量测定方法。苦杏仁苷在101～5030ng间与峰面积线性关系良好，r=0.99999；平均回收率为98.5％，RSD为1.17％（n=5）。方法简便快速、准确可靠，复方中其他成分对测定无干扰，可用于麻黄汤中苦杏仁苷的含量测定。测定了麻黄汤各配伍组合中苦含仁苷的含量，麻黄、桂枝、甘草对方中苦杏仁苷含量的影响没有显著性差异。（3）建立了麻黄汤中甘草酸的HPLC定量测定方法。甘草酸单铵盐在101～5050ng间与峰面积线性关系良好，r=0.99999；平均回收率为102.5％，RSD为1.81％（n=5）。方法快速、准确、灵敏，复方中其他成分对测定无干扰，可用于麻黄汤中甘草酸的含量测定。测定了麻黄汤各配伍组合中甘草酸的含量，麻黄、桂枝、苦杏仁对方中甘草酸含量的影响具有显著性差异。（4）建立了甘草药材的HPLC指纹图谱，标定了甘草药材38个共有指纹峰，方法稳定、可靠、重复性好，符合国家药品监督管理局指纹图谱测定的技术要求，可用于甘草药材指纹图谱的测定。（5）建立了麻黄汤中甘草HPLC指纹图谱，标定了麻黄汤中甘草指纹图谱8个主要的共有指纹峰，考察了麻黄汤各配伍组合水煎液中8个主要共有指纹峰的峰面积变化。麻黄、杏仁显著影响甘草8个共有指纹峰的峰面积，使8个峰的峰面积显著降低；桂枝显著影响甘草6个共有指纹峰的峰面积，使6个峰的峰面显著降低；全方配伍显著影响甘草8个共有指纹峰的峰面积，使8个峰的峰面积显著降低。结论：麻黄汤各组方配伍对佐药苦杏仁有效成分苦杏仁苷、对使药甘草有效成分甘草酸及甘草指纹图谱的影响具有一定的规律性。与单味药材相比，麻黄汤不同配伍使佐药苦杏仁和使药甘草的某些化学成分发生了量的变化，提示：方剂配伍后由于药效物质基础发生了变化，从而产生了不同的药理效应和治疗作用。本课题创新之处：（1）首次对麻黄汤进行拆方组合后，从佐药、使药的有效成分苦杏仁苷、甘草酸的变化层面上阐述麻黄汤配伍规律；首次研究麻黄汤不同配伍对使药甘草指纹图谱发生的影响。研究结果为深入研究麻黄汤组方原理奠定了基础，也为方剂配伍规律的现代研究提供一个可借鉴的方法。（2）首次采用高效液相色谱法一蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）对苦杏仁苷进行了含量测定方法研究。为苦杏仁苷的含量测定提供了一个新方法，可用于苦杏仁药材及含苦杏仁的复方制剂中苦杏仁苷的含量测定。