镉胁迫及缺硫对水稻非蛋白巯基物质含量和谷胱甘肽硫转移酶活性的影响

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我国农田镉(Cd)污染已对水稻(Oryza sativa L.)的安全生产造成了严重的威胁,培养耐Cd水稻品种以减少稻米中Cd的含量,缓解Cd污染带来的食品安全风险具有重要意义。包括谷胱甘肽(GSH)和植物螯合肽(PC)在内的非蛋白巯基(NPT)物质在解除Cd毒害,减少Cd向地上部转运的过程中发挥了重要作用。与GSH的代谢相关的酶类如谷胱甘肽硫转移酶(GST)在植物抵抗Cd胁迫的过程中也发挥着重要作用。本文采用一系列的水培试验,研究了Cd胁迫下,水稻幼苗各部位Cd含量和NPT含量以及GST活性的动态变化,并通过缺硫(S)预处理来探讨供S水平对水稻Cd吸收分配及NPT含量和GST活性的影响,此外,还利用SDS-PAGE电泳技术,对不同时期的水稻幼苗Cd胁迫下的GST蛋白量进行了分析。主要研究结果如下:1 Cd胁迫下水稻体内NPT和GST的动态变化随着50μmol·L-1的Cd胁迫时间的增加,水稻各部位的Cd含量不断增加。Cd在不同部位的含量表现为:根部>根表吸附>地上部>木质部汁液。积累量表现为:胁迫5d前根部>地上部,5d后地上部>根部。GSH含量随胁迫时间的增加而增加,PC和NPT含量根部胁迫前期增加,在5d时达到最大,然后下降,地上部NPT和PC含量变化不大。GST活性表现为先增后降。地上部硫代巴比妥酸反应产物(TBARS)含量随胁迫时间而增加,根部表现为先降低,然后又增加。过氧化氢(H2O2)含量在Cd胁迫下先下降,在5d时含量最低,在7d又增加至对照的水平。研究表明了巯基物质在解除Cd毒害过程中发挥着重要的作用,但其有一定的限度,50μmol·L-1Cd胁迫下5d是水稻体内巯基物质解毒的最高限度。2缺S对Cd胁迫下水稻NPT和GST变化的影响通过设置缺S和Cd胁迫等处理,研究了水稻生长情况、幼苗Cd和巯基物质含量以及GST活性的动态变化。结果表明:Cd处理明显抑制了水稻的生长,缺S预处理后,尽管水稻根部对Cd的吸收和向地上部的转运都有所增加,但Cd胁迫程度并未明显增加。Cd胁迫显著诱导了巯基物质(NPT、GSH和PC)的合成,但在缺S条件下,这些物质的含量较正常供S处理下的明显降低。缺S预处理降低了水稻地上部和根部GST活性,但在Cd胁迫后,GST活性表现出先上升后下降的趋势,而且缺S条件下根部GST活性比单一Cd处理的显著增加。上述结果表明,巯基物质和GST在水稻抗Cd胁迫过程中互为补充,一定程度上减轻了Cd的毒性效应。3 Cd胁迫下水稻GST蛋白的SDS-PAGE分析通过对水稻三叶期和萌发期幼苗的GST进行SDS-PAGE分析,研究了不同时期的水稻幼苗GST蛋白量的情况。结果表明:水稻三叶期根部和地上部的GST活性均表现为胁迫第1天下降,然后增加,在活性达到最大后又下降;而萌发期幼苗则表现为胁迫后GST活性增加,第2天时达最大,然后逐渐降低。萌发期幼苗的GST活性大于三叶期的。GST蛋白量与活性表现不完全一致:三叶期根部GST蛋白条带第3天时最深,表现出活性滞后;地上部不同胁迫时间之间的蛋白量无差异;萌发期幼苗的GST蛋白量则与活性表达基本一致。以上结果表明:在萌发期幼苗的GST活性表达较敏感,但GST蛋白量与活性表现不完全一致。
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