铜蓝蛋白是嗜酸氧化亚铁硫杆菌（Acidithiobacillusferrooxidans，A．ferrooxidans）亚铁氧化系统电子传递链的组分之一，有着高度的酸稳定性和高还原电位。它的功能被认为是介导电子在细胞色素C和终端的细胞色素氧化酶之间传递。本论文从A．ferrooxidans菌中克隆出铜蓝蛋白的基因，表达，并用一步亲和层析法纯化出铜蓝蛋白。我们通过定点突变构建了铜蓝蛋白的突变体C138A，C138D，C138S，H85A，H143A。通过紫外-可见扫描及电子顺磁共振实验证明C138基团对铜蓝蛋白结合铜离子非常重要。亚铁氧化酶被认为参与了A．ferrooxidans菌的亚铁氧化系统的电子传递，它是高电位铁硫蛋白家族的成员之一，含有的铁硫簇中心用于传递电子。本论文从A．ferrooxidans菌中克隆亚铁氧化酶的基因，表达，并通过一步亲和层析法纯化出蛋白。表达的蛋白为二聚体，通过MALDI-TOF质谱检测单体的分子量为6860.6Da。紫外及电子顺磁共振结果证实铁硫簇正确结合了蛋白的活性位点。蛋白的分子结构模拟显示Cys20，Cys23，Cys32和Cys45参与了铁硫簇的结合，而Tyr10对于铁硫簇的稳定也十分重要。据我们所知，这是首次在E.coli中表达来源于A．ferrooxidans Fe-1的亚铁氧化酶。由iscSUA操纵子编码的三个蛋白IscS（半胱氨酸脱硫酶），IscU（支架蛋白）和IscA（铁离子伴侣）参与了A．ferrooxidans菌中铁硫簇结构的组装，但是组装机理至今仍不清楚。从A．ferrooxidans菌中克隆IscA的基因，表达，并通过一步亲和层析法纯化出蛋白。紫外及电子顺磁共振结果证实铁硫簇正确结合了蛋白的活性位点，这个蛋白能够补充细胞内铁和硫的浓度并且提供稳定的[Fe₄S₄]结构。[Fe₄S₄]结构可以在体外利用铁和硫离子组装到apoIscA。我们通过定点突变构建了蛋白的突变体C35A，C99A，C101A。分子模拟及紫外、电子顺磁共振结果证明了C99和C101参与铁硫簇的结合，而C35也影响蛋白与铁硫簇的结合。A．ferrooxidans菌中的IseA可能作为一个平台完善铁硫簇结构的前组装并把它传递给目标蛋白，这对于A．ferrooxidans菌中其他铁硫蛋白如HiPIP的成熟是必需的。