目的本研究通过单独和联合使用9-顺式维甲酸（9-cis retinoic acid,9-cis RA）和1α,25二羟维生素D3[1 alpha,25一dihydroxy vitamin D₃,l,25（OH）₂D₃],观察其对神经母细胞瘤（neuroblastoma,NB）细胞系生长、分化、凋亡的影响,探讨其协同作用的效果及相关机制。方法将NB SK-N-SH细胞分为A（对照组）,B（9-cis RA用药组）,C（1,25（OH）₂D₃用药组）,D（9-cis RA和1,25（OH）₂D₃联合用药组）四组,在处理后适当的时间用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞抑制率,倒差显微镜观察细胞形态的改变,流式细胞仪（flow cytometry,FCM）检测细胞凋亡的变化,同时用逆转录多聚酶链反应（reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR）检测维甲酸受体β（Retinoic Acid Receptor beta,RARβ）的mRNA表达情况。结果单独使用9-cis RA或1,25（OH）₂D₃和联合用药的细胞生长均受到抑制,并呈时间依赖关系,其中联合用药组抑制率明显高于单独用药组（P<0.05）,形态学分化明显;MTT法测定显示联合用药能显著提高NB细胞抑制率并明显优于单独用药组（P<0.05）;FCM钙依赖性磷脂结合蛋白V和7-氨基放线菌素D（Annexin V/7-AAD）染色法检测显示联合用药对诱导NB细胞早期凋亡和坏死具有显著的协同作用;RT-PCR检测发现联合用药组RARβ的mRNA表达明显高于其他组。结论9-cisRA联合1,25（OH）₂D₃在体外对NB SK-N-SH细胞系的生长抑抑制、分化、凋亡能产生明显的协同抑制作用,在小剂量的情况下即能起到显著的治疗效果,明显优于其单独用药,其协同作用的机制可能为通过增加RARβ的mRNA表达水平来抑制肿瘤的生长,为其联合应用于临床提供理论依据和指导。