维生素K2及其联合维生素D3对去卵巢大鼠骨及骨外的影响

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研究背景随着人口老龄化进展,骨质疏松症患者日趋增多。由于女性峰骨量较低,绝经后雌激素水平显著下降,骨丢失加速,因此绝经后女性是骨质疏松症和骨质疏松性骨折的高危人群。尽管雌激素治疗是预防绝经后骨质疏松的最佳选择之一,但长期应用存在一定风险,中国的绝经妇女亦未普遍接受。维生素D(vitamin D,VD)作为防治骨质疏松症的基础用药已普遍为患者接受,但单一用药作用有限。研究发现维生素K(vitamin K,VK)除凝血功能之外,尚能促进骨形成、抑制骨吸收,能够防治骨质疏松症。在理论上,VK与VD联合使用具有协同或增强效应。此外,VK2可以预防血管钙化,降低心血管病的发生率。目前的研究结果未发现用于骨质疏松防治剂量的VK2对凝血系统的不利影响,安全性较好。目的观察VK2及其与维生素D3联合应用对去卵巢大鼠骨质疏松模型的预防效果,同时观察其对血管钙化、血脂和凝血系统的影响,为VK2预防绝经后骨质疏松症提供实验证据。方法模拟人绝经后骨质疏松的动物模型:选择37只SPF级10月龄雌性SD大鼠,按体重随机分为5组:假手术组(Sham)(8只)、去卵巢组(OVX)(8只)、OVX+VK2组(7只)、OVX+VD3组(VD3)(7只)及OVX+VK2+VD3组(7只)。双侧卵巢切除术后2周进行药物灌胃,VK2剂量为30mg/kg/d、VD3剂量为0.1ug/kg/d,Sham组及OVX组喂以净化水2.5ml/kg/d。14周后进行骨密度、骨转换指标、骨组织计量学和骨生物力学测定,并检测血脂、凝血指标,组织学观察胸主动脉的钙化情况。结果对骨的影响:(1)骨转换指标:OVX组BALP和uDPYD显著升高。与OVX组比较,VK2组uDPYD和uCa/uCr明显增加。VD3组BALP明显降低,VK2+VD3组各项指标和OVX组比较无明显变化。与sham组相比,VK2组uDPYD显著升高。VK2和VD3对uDPYD的作用存在交互效应。(2)骨密度(BMD):OVX组腰椎BMD显著低于sham组和各用药组;用药组腰椎BMD与sham之间没有明显差异。与OVX组相比,VD3组左侧股骨、VD3+VK2组和Sham组双侧股骨BMD显著升高。与sham组比较,VK2组双侧股骨BMD明显降低,而VD3组和联合用药组较之无明显差异。VK2+VD3组与VK2组相比,其右侧股骨BMD较之明显升高。(3)骨组织形态计量学:OVX组的骨形成参数和骨吸收参数均高于sham组,其中%L.Pm与sham组有统计学差异。OVX组较sham组的骨小梁数量减少,厚度变薄,分离度增加,但无统计学意义。各用药组与OVX组比较,VK2+VD3组和VD3组的骨小梁形成参数增高,其中BFR/BS和MAR的差异有统计学意义;VK2组骨形成参数和OVX组相似。各用药组的骨吸收参数及骨量和骨结构参数与OVX组比较亦无明显差异。VK2+VD3组与VK2组相比,MAR和BFR/BS显著升高;而%E.Pm显著下降。骨量和骨结构参数值在各用药组之间无明显差异。各用药组与sham组相比,骨形成参数值均升高,尤其以VD3组和VK2+VD3组更为显著,此两组的%L.PM、MAR和BFR/BS均与Sham组有统计学差异。VK2组与之相比,%L.PM呈升高趋势,BV/TV明显低于Sham组,而Tb.Sp显著高于sham组;其它组的骨量和骨结构参数与sham组相比未见明显差异。(4)生物力学指标:OVX组和sham组比较各项指标没有统计学差异。用药组和OVX组、Sham比较,各项生物力学指标亦无显著差异。(5)血钙:与OVX组和Sham比较,VD3组和VK2+VD3组血钙升高;VK2组无明显变化。VK2+VD3组血钙水平高于VK2组,两者间差异有统计学意义。骨外影响:(1)凝血酶原时间:各组无统计学差异。(2)血脂:与OVX组比较,VK2组除LDL升高外其它指标无显著性改变;VD3组TC和LDL较OVX组有显著升高;VD3+VK3组TC、HDL和LDL均显著升高;VD3组和VK2+VD3组各项指标与Sham组比较无差异。VK2和VD3在LDL上有交互作用。(3)主动脉:胸主动脉钙化在sham组1例、OVX组3例,VD3组及VD3+VK2组各2例,VK2组未发现血管钙化。结论(1)30mg/kgBW的VK2可以维持去卵巢大鼠BMD,同时可能预防血管钙化,且不增加大鼠高凝风险,对血脂无不利影响;(2)0.1ug/kgBW的VD3可以维持去卵巢大鼠BMD,并且对血管钙化和血脂无不利影响;(3)VK2与VD3联合用药的促进骨形成和抑制骨吸收作用优于VK2单药,有效地维持了去卵巢大鼠骨密度。二者合用对血脂、凝血、血管钙化无明显影响。
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