【摘 要】
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ArcB/ArcA二组分系统是大肠杆菌应答无氧环境的关键信号蛋白。然而,我们发现在有氧条件下,ArcA也影响细胞周期。本文发现在LB培养基中,arcA基因的突变延迟DNA复制起始,同时导
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ArcB/ArcA二组分系统是大肠杆菌应答无氧环境的关键信号蛋白。然而,我们发现在有氧条件下,ArcA也影响细胞周期。本文发现在LB培养基中,arcA基因的突变延迟DNA复制起始,同时导致细胞变小、生长缓慢;在ABTGcasa培养基中,arcA基因的突变使DNA复制起始提早发生,导致细胞变大;这些结果说明,ArcA对DNA复制起始、细胞大小以及细胞生长的影响依赖于营养。有趣的是,ArcB突变体复制起始也发生改变,并且其变化规律与Δarc A相同,也依赖于营养。结果说明ArcB/ArcA信号通路影响DNA复制起始。Western blot结果显示LB培养基中arcA的突变导致单细胞DnaA量的降低,在ABTGcasa中得到相反的效果。经过分别尝试二十种氨基酸,发现添加半胱氨酸使ΔarcA细胞复制起始向野生型方向改变,其作用也依赖于营养条件。本文也发现ArcA-GFP融合蛋白在LB培养基中与染色体共定位,而在ABTGcasa培养基中,其细胞定位与染色体无关。综上所述,ArcA蛋白通过改变DnaA蛋白量来影响复制起始,其作用依赖于营养。
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