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目的:Zeste基因抑制子基因12(suppressor of Zeste 12,SUZ12)是多梳蛋白家族(polycomb group protein,PcG)的核心亚基之一,其在促进细胞增殖、抑制细胞凋亡以及增强细胞恶性转化能力等方面发挥着重要的调控作用。本研究拟探索下调SUZ12表达对人宫颈癌细胞和食管癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法:1.以siRNA干扰技术下调SUZ12的表达;2.Western blot法检测siSUZ12下调人宫颈癌细胞和食管癌细胞蛋白的表达水平;3.MTT、平板克隆法检测下调SUZ12对人宫颈癌细胞和食管癌细胞增殖的的影响;4.流式细胞术检测siSUZ12对细胞周期的作用;5.β-半乳糖苷酶染色法检测siSUZ12对细胞衰老的诱导作用。6.慢病毒转染法构建目的蛋白过表达细胞株。结果:针对SUZ12的siSUZ12可有效下调细胞中SUZ12的表达。10nM的siSUZ12即可产生抑制Hela与MS751细胞增殖的效果,100nM作用达峰值;SiHa细胞20nM可产生抑制细胞增殖的效果,50nM时抑制效果最明显。与对照组相比,人宫颈癌Hela细胞在50nM转染后第5天,其增殖率为56.13±7.78%(P<0.01);MS751细胞与SiHa细胞在50nM转染后第7天增殖率分别为48.01±6.92%(P<0.01)与38.29±5.70%(P<0.01)。人食管癌Kyse-150细胞在10nM的siSUZ12可产生抑制细胞增殖的效果,50nM时达到最大值;转染后第6天,增殖率为38.61±5.32%(P<0.01)。细胞平板克隆实验结果:Hela细胞阴性对照组和siSUZ12组克隆形成数分别是152.00±16.37和112.33±8.08(P<0.05);MS751细胞阴性对照组和siSUZ12组克隆形成数分别是26.00±9.17和3.67±1.53(P<0.01);SiHa细胞阴性对照组和siSUZ12组克隆形成数分别是48.33±1.15和23.33±7.02(P<0.05);Kyse-150细胞阴性对照组和siSUZ12组克隆形成数分别是42.67±3.06和9.67±2.89(P<0.01)。细胞周期结果显示,Hela细胞在siSUZ12作用48h,G0/G1期的比例明显增加(P<0.05),显示细胞发生G1/S期阻滞。而SiHa细胞在siSUZ12作用60h,G2/M期细胞数比例显著升高(P<0.01),显示细胞发生G2/M期阻滞。Kyse-150细胞在siSUZ12作用96h,G0/G1期的比例明显增加(P<0.01),显示细胞发生了 G1/S期阻滞。下调SUZ12后上述肿瘤细胞均发生胞内颗粒增多,β-半乳糖苷酶染色阳性细胞比例增多,呈明显的衰老表征。siSUZ12与顺铂联用,顺铂对宫颈癌细胞和食管癌细胞的半数致死量明显下降,联合治疗指数CI值<1,表明siSUZ12与顺铂具有联合协同作用。Western blot结果显示,下调SUZ12表达后,细胞内CDC25C的表达明显被抑制,而过表达CDC25C能明显拮抗siSUZ12对细胞的抑制作用。结论:1.以siSUZ12下调SUZ12表达能有效抑制人宫颈癌细胞和食管癌细胞的增殖。2.下调SUZ12表达可使Hela与Kyse-150细胞发生G1/S期阻滞,使SiHa细胞发生G2/M期阻滞,诱导细胞发生衰老。3.下调SUZ12能增加人宫颈癌细胞和食管癌细胞对顺铂的敏感性。4.下调SUZ12是通过干扰CDC25C的表达,产生抑制细胞增殖的作用。