化浊解毒方对慢性萎缩性胃炎大鼠Hippo/TAZ信号通路及相关蛋白的影响

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目的:通过检测慢性萎缩性胃炎(Chronic Atrophic Gastritis,CAG)大鼠模型的一般状况、胃黏膜组织病理改变、胃黏膜组织中Hippo/TAZ信号通路及其相关蛋白TAZ、LATS2、MST1表达水平的变化,探讨化浊解毒方治疗CAG的作用机制,进一步完善浊毒理论体系,为临床防治CAG提供客观依据和新思路。方法:70只健康成年清洁级雄性SD大鼠,分为正常组(Normal Gro up,N)12只,模型组(Model Group,M)58只。采用联合造模法建立CAG大鼠模型成功后随机分为5组:自然恢复组(Spontaneous Recovery Group,SR)、化浊解毒方高剂量组(High-doze Group,HG)、化浊解毒方中剂量组(M oderate-doze Group,MG)、化浊解毒方低剂量组(Low-doze Group,LG)、维酶素组(Vitacoenzyme Group,VG),每组各10只。HG组、MG组、LG组分别给予不同浓度化浊解毒方中药悬浊液灌胃,VG组给予维酶素混悬液灌胃。采用HE染色法观察胃黏膜组织病理改变,免疫组织化学染色法(SP法)、蛋白质印记法(Western Blot)、实时荧光定量PCR技术检测胃黏膜组织中Hippo/TAZ信号通路相关调节蛋白TAZ、LATS2、MST1表达水平的变化。使用SPSS21.0统计软件分析所有数据。结果:1.一般状况造模阶段,N组大鼠一般状况良好。M组大鼠状态不佳,变化显著。治疗阶段,HG组大鼠症状有明显改善。MG、VG组大鼠一般情况有所改善,LG组、SR组大鼠一般情况改善不明显。2.化浊解毒方对CAG大鼠胃黏膜中TAZ表达水平的影响HG组光密度平均值、最后灰度值、mRNA均低于VG组、MG组、LG组,差异有统计学意义(P<0.05),MG组与VG组相近,差异无统计学意义(P=0.237,P>0.05),LG组高于VG组,差异有统计学意义(P<0.05),MG组低于LG组,差异有统计学意义(P<0.05)。3.化浊解毒方对CAG大鼠胃黏膜中LATS2表达水平的影响HG组的光密度平均值、最后灰度值、mRNA均高于VG组、MG组、LG组,差异有统计学意义(P<0.05),MG组、LG组均低于VG组,差异有统计学意义(P<0.05),MG组高于LG组,差异有统计学意义(P<0.05)。4.化浊解毒方对CAG大鼠胃黏膜中MST1表达水平的影响HG组的光密度平均值、最后灰度值、mRNA均高于VG组、MG组、LG组,差异具有统计学意义(P<0.05),MG组、LG组均低于VG组,差异有统计学意义(P<0.05),MG组高于LG组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:化浊解毒方在CAG大鼠模型中可通过降低胃黏膜组织中TAZ蛋白表达水平,增加LATS2、MST1蛋白的表达水平而起作用。高剂量的化浊解毒方能显著改善胃黏膜病理情况,在Hippo/TAZ信号通路的调节过程中,对负调TAZ蛋白,正调LATS2、MST1上均优于维酶素组。
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