随着各种免疫检查点抑制剂和嵌合抗原受体T细胞疗法的发展和监管批准,免疫疗法彻底改变了许多癌症的治疗方法。其中,抗原多肽疫苗已被确定为癌症免疫疗法中一种较有前途的策略,但由于抗原免疫原性较低,使得这一疗法的治疗效果大打折扣。此外,多肽的理化特性及疫苗配方的可变性、灵活性和可行性也使得这一疗法面临着重大挑战。因此,研究如何提高抗原多肽的免疫原性,改善免疫抑制微环境以及简化疫苗配方,是抗原多肽疫苗疗法中亟需解决的问题。在这些问题导向下,本文以自组装表位疫苗为主线,以增强其抗肿瘤免疫效果为目标,开展了如下工作:为了提高抗原免疫原性,我们在自组装疫苗中加入Toll样受体9（TLR9）激动剂CpG,并通过联合免疫检查点抑制剂1-甲基色氨酸（1-MT）逆转免疫抑制。吲哚胺2,3-二加氧酶（IDO）是一种关键的代谢酶,可以显著抑制效应T细胞反应,而1-MT为IDO抑制剂的一种。本文首先设计了一种基于阳离子聚合物-脂质杂化纳米囊泡（P/LNV）,使其同时递送阴离子抗原表位/CpG（AE/CpG）以及1-MT,以构建肿瘤疫苗。一方面增加多肽抗原的免疫原性,同时阻断了免疫检查点。另一方面P/LNV脂质体有效地增强了树突状细胞（DCs）对疫苗的摄取,促进了DCs的成熟,并介导了针对B16-OVA肿瘤的抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）反应。更重要的是,在体内抑瘤实验中,与未治疗或单一治疗方式相比,联合免疫疗法对小鼠的黑色素瘤细胞显示出了更好的治疗效果。从机制上讲,共递送系统可引起强烈的肿瘤特异性T细胞反应,肿瘤和引流淋巴结中CD8+T细胞的浸润明显增多。实验结果表明,设计的阳离子脂质体能在激发抗肿瘤T细胞免疫的同时逆转肿瘤免疫抑制性微环境,可为癌症免疫疗法提供一个有希望的递送平台。在肿瘤疫苗的设计中,通常选择联合免疫佐剂来提高其免疫原性。为了使疫苗设计简单化,我们设计了一种无需免疫佐剂和递送载体的双表位疫苗。具体说来,即利用靶向CD8或CD4 T细胞受体的抗原表位结合肽（ECP）的超分子共组装制备纳米纤维水凝胶疫苗。该疫苗能够精确地调节多肽抗原的负载量,从而增强DCs对抗原的摄取、交叉呈递和自身活化。小鼠体内免疫实验表明,共组装多肽水凝胶疫苗不会诱导局部炎症反应,并通过激活DCs中依赖My D88的NF-κB信号通路而促进T细胞免疫应答。与游离多肽疫苗或铝佐剂疫苗相比,在不使用其他免疫佐剂和递送载体的条件下接种水凝胶疫苗的小鼠对EG.7-OVA肿瘤的CD8和CD4 T细胞免疫反应明显增强,且抑瘤效果明显。总而言之,通过自组装制备的单价或多价的表位疫苗能够实现抗原呈递的简单化、定制化和精确化,并且可诱导更强的抗肿瘤T细胞反应,从而增强肿瘤的免疫治疗效果。