论文部分内容阅读
食源性致病菌引发的食品安全问题不仅危害人们的身体健康,而且还严重损害国家和食品企业的经济利益,抗生素滥用导致食源性致病菌产生的强耐药性以及抗生素的禁用,使控制食源性致病菌变得更加困难,寻找一种高效、无毒、易制取能抑制食源性致病菌的抑菌药物成了本研究的主要内容。氯代肉桂醛(α-Chlorocinnamaldehyde,CA-Cl)是植物精油肉桂醛(Cinnamaldehyde,CA)的衍生物,其具有比肉桂醛更好的防腐抑菌效果。但是,由于CA-Cl属于精油类物质,与水不相溶、具刺激性气味和高度挥发等特性会限制其在实际工作中的应用。试验表明将精油纳米化是有效解决这一问题的方法之一,本文采用低能自发乳化的方法制备了水包油(Oil in water,O/W)型的氯代肉桂醛纳米乳(Nano-α-chlorocinnamaldehyde,Nano-CA-Cl),对纳米乳质量进行了评价,并比较了纳米化和非纳米化氯代肉桂醛的抑菌活性与生物安全性,同时进行了水产保鲜和环境消杀剂的应用研究。纳米乳采用低能自发乳化法—水滴定法进行制备,借助Origin8.0软件绘制伪三元相图,比较乳区面积的大小筛选出最佳的纳米乳配方为:W(氯代肉桂醛)=2.81%,W(橄榄油)=1.02%(油相),W(吐温-80)=25%(表面活性剂),W(乙醇和1,2-丙二醇)=6.25%(v:v=13:12,混合助表面活性剂),W(蒸馏水)=64.92%。制备好的纳米乳外观澄清透明,通过染色法鉴定其结构类型为O/W型。通过透射电镜观察到纳米乳乳滴呈现规则的球形,形态大小较一致,分散性良好,无破乳团聚等现象。激光粒度分析仪的结果显示:多分散系数(Polydispersity index,PDI)为0.16,乳滴平均粒径为15.88±1.01 nm,粒径分布范围在10~50 nm之间。经过各项稳定性试验后,纳米乳乳液状态没有破乳、絮凝、沉淀等不稳定现象出现,因此该纳米乳体系稳定性良好。通过溶血实验对比Nano-CA-Cl和CA-Cl的生物安全活性,在100μg/m L时CA-Cl引起血红细胞破裂,而Nano-CA-Cl的浓度需达到300μg/mL才能引起红细胞破裂,因此纳米化不仅改善了CA-Cl的水难溶性更有效增强了CA-Cl的生物安全性。通过抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌等常见食源性病原菌的结果发现,Nano-CA-Cl相比CA-Cl的抑菌活性提升了50%~200%,并且Nano-CA-Cl在高浓度下能够有效清除金黄色葡萄球菌形成的生物膜。把Nano-CA-Cl作为涂膜材料对草鱼进行涂膜冷藏保鲜,经过涂膜的草鱼感官品质和pH值都优于对照组,菌落总数少于对照组,且涂膜药物浓度越高保鲜效果越显著。通过Nano-CA-Cl作为环境消杀剂对金黄色葡萄球菌ATCC25923的定性试验,Nano-CA-Cl杀灭金黄色葡萄球菌的最低有效浓度为30 mg/L(此条件下的杀菌时间为20 min),Nano-CA-Cl消毒剂杀灭金黄色葡萄球菌的最短时间为5 min(此条件下最低杀菌浓度为60 mg/L)。悬浮定量杀菌实验的结果显示:采用Nano-CA-Cl消毒剂的最低有效杀菌浓度30 mg/L杀菌30 min时,杀菌率为99.6%,当采用60 mg/mL杀菌浓度杀菌7.5 min时,杀菌率为99.5%。