前言：　　 脑胶质瘤是颅内常见的恶性肿瘤,侵袭性强,术后复发快,是神经外科临床工作中最棘手的难治性肿瘤之一。即使采用手术和术后放化疗等综合治疗,目前为止临床治疗效果仍不尽人意。即使是相同病理类型及级别的胶质瘤,预后也存在很大差异。治疗上的差异无疑是其重要的影响因素,但肿瘤内在的生物学特性,特别是分子水平的差异才应该是关键所在。因此,深入研究胶质瘤的分子生物学特征具有重要的理论和实践意义,近年来低氧诱导因子在肿瘤发生发展和预后中的作用受到关注。缺氧诱导因子是一类介导低氧反应的转录因子,能激活许多缺氧相关基因的表达,是在缺氧条件下维持氧稳态的关键性物质。大量资料显示,HIFs与肿瘤行为的诸多重要方面均有关。首先,在实体瘤内,很易观察到HIFs的活化:其次,细胞培养时,HIFs可调控与肿瘤相关的基因的表达;第三,HIFs的失活对肿瘤模型的行为有重要作用。本研究应用免疫组化方法,检测了43例胶质瘤组织中HIF-1α、HIF-2α的表达情况,探讨HIF-1α、HIF-2α在不同级别胶质瘤中的表达情况。　　 材料与方法：　　 一、标本　　 2009年10月至2010年11月间我院神经外科手术切除且保存完好的43例胶质瘤组织的石蜡包埋标本。男24例,女19例,平均年龄42岁。年龄范围16-72岁。3例正常脑组织为脑出血手术时经皮层造瘘切除的脑组织,均经病理证实为正常脑组织。根据2000年WHO中枢神经系统肿瘤分级标准,其中胶质瘤Ⅰ级5例,胶质瘤Ⅱ级13例,胶质瘤Ⅲ级21例,胶质瘤Ⅳ级4例。　　 二、主要试剂　　 兔抗人缺血诱导因子-1α、兔抗人缺血诱导因子-2α购自北京博奥森公司,SP染色试剂盒和DAB显色试剂盒均购自北京中山生物公司。　　 三、实验方法　　 常规PBS(pH=0.1)代替一抗作为阴性对照。染色步骤:石蜡切片60°烤箱烤片15min,梯度乙醇脱蜡至水,3%H2O2室温孵育15min,0.1%EDTA150ml微波抗原修复45min,凉至室温,10%血清封闭15min,加入1:100一抗4°过夜,生物素化二抗室温孵育35min,加链亲素酶标室温孵育30min,DAB显色10min,脱水,透明,中性树胶封固。　　 四、结果判定　　 细胞核有浅黄色、棕色、棕褐色颗粒为阳性细胞,观察5个高倍镜视野(10×40倍)阳性细胞所占比例,无阳性细胞或阳性细胞数＜1%为阴性,阳性细胞数1%～10%为阳性(+),11%～50%为中度阳性(++),＞50%为强阳性(+++)。　　 五、统计学分析　　 统计学处理采用SPSS19.0统计分析软件,采用X2检验计算Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级之间的差异。P＜0.05为差异有统计学意义。　　 实验结果：　　 1、HIF-1α、HIF-2α在正常脑组织中呈现阴性表达。　　 2、HIF-1α阳性染色主要定位于细胞胞核中,呈棕色、棕褐色颗粒。不同级别胶质瘤中HIF-1α蛋白表达阳性表达分别为偏良性的肿瘤(Ⅰ～Ⅱ级)阳性率为55.56%,其中大多相对染色淡,刚性细胞数少;偏恶性的肿瘤(Ⅲ～Ⅳ级)阳性率为88%,染色深,阳性细胞多。P＜0.05,有显著性差异。　　 3、HIF-2α阳性染色主要定位于细胞胞核中,胞浆也有表达,呈棕黄色颗粒。不同级别胶质瘤中HIF-2α蛋白表达阳性表达分别为偏良性的肿瘤(Ⅰ～Ⅱ级)阳性率为44.4%,其中大多相对染色淡,阳性细胞数少;偏恶性的肿瘤(Ⅲ～Ⅳ级)阳性率为84%,染色深,阳性细胞多。P＜0.05,有显著性差异。　　 结论：　　 1、证实HIF-1α、HIF-2α在人脑胶质瘤中呈阳性表达。　　 2、HIF-1α、HIF-2α在高级别胶质瘤中的表达高于低级别胶质瘤。