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痛经可分为原发性痛经和继发性痛经两大类,其中原发性痛经病因复杂,是目前妇科最常见疾病,严重影响了妇女正常工作和生活质量。近年来研究表明,中医药在治疗痛经疼痛的同时,还可改善血液流变性,揭示其在痛经的症状改善及远期疗效方面有明显的优势。坤痛宁胶囊是由当归,红花,桃仁(炒),熟地黄,鹿茸等组成的复方,经多年临床应用证实对月经不调,带下,行经腰腹疼痛有良好疗效。为进一步探讨其作用机制,本实验分别观察:1 对正常大鼠离体子宫平滑肌收缩的影响; 2 对催产素所致离体大鼠子宫平滑肌收缩的影响;3 对醋酸诱发疼痛的影响; 4 对二甲苯所致小鼠耳肿的影响;5 对正常大鼠血液流变学的影响。
目的:观察坤痛宁胶囊对正常及催产素所致大鼠离体子宫平滑肌收缩,醋酸诱发疼痛,二甲苯所致小鼠耳壳肿胀及正常大鼠血液流变学的影响,探讨药物可能的作用机制,为临床用药提供理论依据。
方法:1坤痛宁胶囊对大鼠离体子宫平滑肌收缩的影响:采用常规方法制备大鼠离体子宫标本,通过BL-420型生物机能实验系统,以子宫平滑肌收缩张力作为评价指标。(1)对正常大鼠离体子宫平滑肌的影响:记录一段子宫收缩曲线后,分别加入不同浓度的坤痛宁胶囊内容物(用1%二甲基亚砜(DMSO)配制)25 μ L(含生药浓度30mg/ml、60mg/ml及120mg/ml,浴槽中药物终浓度分别为25 μ g/ml、50 μg/ml、100 μg/ml),对照组加痛经宝溶液25 μ L(配制浓度根据药典折合生药浓度为60mg/ml,浴槽中药物终浓度分别为50 μg/ml),溶剂对照组1% DMSO 25 μ L,观察给药前后子宫收缩张力,并且每组进行给药前后比较。(2)对催产素所致大鼠离体子宫平滑肌收缩的影响:按上述实验方法,在正常收缩的子宫平滑肌中加入催产素0.01U/ml,5min后分别加入上述各组药物,观察给药后子宫收缩张力的变化。 2 坤痛宁胶囊对醋酸诱发疼痛作用的影响:坤痛宁胶囊低,中,高剂量组分别给予0.6g生药/kg,1.2g生药/kg,2.4g生药/kg,模型组给予等体积蒸馏水,对照组给予去痛片1.6mg/kg,连续3d,灌胃给药,末次给药1h后腹腔注射0.6%冰醋酸(0.2ml/只),记录30min内小鼠扭体次数,并计算抑制率。
3.坤痛宁胶囊对二甲苯所致小鼠耳壳肿胀的影响:坤痛宁胶囊按上述不同剂量给药,对照组给予强的松1.3mg/kg,模型组给予等体积蒸馏水,灌胃给药,1次/d,连续7d,小鼠左耳给予二甲苯后取材,以两耳片重量差值作为肿胀程度指标。
4 坤痛宁胶囊对正常大鼠血液流变学的影响:坤痛宁胶囊低、中、高剂量组分别给予0.4g生药/kg,0.8g生药/kg,1.6g生药/kg,阳性对照组给予阿司匹林0.45mg/kg,模型组等体积蒸馏水灌胃,由大鼠腹动脉采血,测定全血粘度,血浆粘度,红细胞压积等血液流变学指标。
结果:1 坤痛宁胶囊对大鼠离体子宫平滑肌收缩的影响(1)对正常大鼠离体子宫平滑肌收缩的影响结果显示,坤痛宁胶囊高剂量组(100 μg/ml)可降低正常大鼠离体子宫平滑肌收缩张力,与溶剂对照组比较,均具有显著性差异(P<0.05)。(2)对催产素所致大鼠离体子宫平滑肌收缩的影响结果显示,坤痛宁胶囊各组(25 μ g/ml,50 μ g/ml,100 μg/ml)均使催产素收缩的离体子宫平滑肌张力显著下降,与溶剂对照组比较,均有显著性差异(低剂量P<0.05,中、高剂量P<0.01)。痛经宝颗粒50 μg/ml亦可显著降低子宫平滑肌张力(P<0.01)。 2 坤痛宁胶囊对醋酸所致小鼠疼痛作用的影响坤痛宁胶囊(0.6g/kg、1.2 g/kg、2.4 g/kg)各剂量组给药均使小鼠30min内的扭体次数显著减少,与模型组比较,有显著性差异(低剂量组P<0.05,中、高剂量组P<0.01)。
3.坤痛宁胶囊对二甲苯所致小鼠耳壳肿胀的影响低、中、高剂量组(0.6g/kg、1.2 g/kg、2.4 g/kg)均显著抑制二甲苯所致的小鼠耳壳肿胀,与模型组比较,均有显著差异(P<0.01)。
4 坤痛宁胶囊对正常大鼠血液流变学的影响胶囊高剂量组(1.6g/kg)全血粘度,红细胞压积分别与正常组比较,具有显著性差异(P<0.05)。
结论:1 胶囊高剂量组能显著抑制正常大鼠离体子宫平滑肌收缩,胶囊各组对催产素所致大鼠离体子宫平滑肌收缩均有不同程度的抑制作用,并随剂量加大抑制作用加强。说明胶囊具有抑制子宫平滑肌收缩,缓解痛经的作用。
2.胶囊各组均能明显减少醋酸所致小鼠扭体次数,说明具有镇痛作用。
3.胶囊各组对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀均有明显的抑制作用,说明具有抗炎作用。 4 胶囊高剂量组能够显著降低大鼠全血粘度和红细胞压积,有改善血液流变性的作用。