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目的:研究转染SPATA5L1基因后人口腔上皮癌KB细胞株p EX-1-SPATA5L1-KB,以了解高表达SPATA5L1蛋白在上皮细胞-间质转化(EMT)过程中的生物学作用。方法:免疫荧光法激光共聚焦显微镜观察SPATA5L1在KB细胞中的定位,同时通过Western blot方法分别检测KB细胞的核蛋白和浆蛋白,确定SPATA5L1在KB细胞中的表达和定位。Western blot方法检测稳定转染后的p EX-1-SPATA5L1-KB中SPATA5L1蛋白表达量。采用Transwell细胞侵袭实验检测SPATA5L1对KB细胞侵袭能力的改变,扫描电镜观察细胞形态的变化尤其是伪足的变化。利用CCK-8法及18F-FLT掺入法测定转染细胞的增殖能力,并与空转染细胞对照。Western Blot法检测各转染细胞和对照细胞中E-cadherin、N-cadherin及Vimentin等EMT相关标志蛋白的表达水平,检测与Wnt信号通路有关的几个蛋白表达水平。结果:SPATA5L1在KB细胞中主要定位在细胞质中,细胞核中无表达。相比于空转染细胞,稳定转染细胞株p EX-1-SPATA5L1-KB中目的基因SPATA5L1具有高表达,其侵袭能力明显增加,且细胞形态由正多边形变为纺锤体形,并且细胞表面丝状伪足明显增长且数量增多,其细胞增殖能力增强。SPATA5L1在KB细胞中过表达能够抑制上皮细胞标志物E-cadherin的表达,并促进间质细胞标志物N-cadherin和Vimentin的表达。Wnt信号通路相关蛋白Dvl2、Dvl3、LRP6表达量显著升高,Axin1的表达量显著降低。结论:SPATA5L1基因编码的蛋白在KB细胞中定位于细胞质中。SPATA5L1过表达可以促进口腔上皮癌细胞EMT的发生,增强其增殖和侵袭能力。SPATA5L1诱发KB细胞发生EMT的分子机制可能是通过调节Wnt信号通路来实现的。