周细胞通过调控CD206受体减轻脑梗死后脑水肿

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目的:探究周细胞表面受体CD206在脑梗死后血脑屏障破坏及脑水肿中的保护作用。  方法:选取SD大鼠以线栓法建立永久性大脑中动脉栓塞模型(pMCAO),术后CD206的时空变化以脑组织免疫荧光法来观察,以免疫印迹法(western blot)检测不同时间点CD206的表达量。以腺病毒于梗死周边区多部位注射过表达CD206受体,采用伊文氏蓝外渗法,MR成像法观察血脑屏障渗透性和脑水肿程度,氯化三苯基四氮唑染色法(TTC)检测梗死区域体积,免疫印迹法(Western blot)检测梗死周边区CD206分子表达水平。原代培养脑微血管周细胞,应用糖氧剥夺模型(OGD),以PCR,WB,细胞免疫荧光法检测不同时间点CD206、HIF1a的表达变化。加入外源性tPA,检测周细胞对tPA的内吞作用。以跨细胞膜电阻测量法(TEER),异硫氰酸荧光素葡聚糖渗漏法(FITC-dextran)检测体外血脑屏障模型通透性。以染色质免疫共沉淀法(CHIP)检测HIF1a与CD206的直接调控作用。  结果:1、过表达CD206分子可减轻大鼠梗死体积,降低脑水肿程度,改善缺血性卒中预后。2、周细胞OGD后通过高表达CD206,清除降解tPA,保护血脑屏障完整性。3、脑梗死早期的CD206特异性的表达于周细胞。4、周细胞OGD后CD206的表达依赖于HIF1a的直接调控。  结论:周细胞通过高表达CD206受体清除内源性tPA,从而减轻脑梗后血脑屏障破坏及脑水肿。
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