抗幽门螺杆菌免疫乳的制备及其研究

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本试验研究了牛抗幽门螺杆菌抗体IgG-Hp的制备方法。以幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)全菌抗原免疫泌乳母牛,收集免疫后的牛乳,建立间接ELISA法测定其Hp抗体的水平,并观察特异性抗体的产生规律。结果表明,每头牛每次肌肉注射4×10~9CFU全菌抗原能有效地引起免疫应答,乳中的抗体效价可以维持较长的时间。成年牛的免疫应答规律于青年牛相同。 探索建立了幽门螺杆菌感染C57BL/6小鼠的胃感染模型的方法。采用国际标准菌株NCTC11637灌喂C57BL/6小鼠,所有动物灌喂接种前禁食24h,接种前12h灌胃90%的乙醇0.4mL/只。灌胃接种0.4mL/只,实验组灌喂菌液,对照组灌喂生理盐水,隔日1次,连续3次。灌喂后再禁食水4h。在末次灌喂4w后分批以脊脱臼法处死实验组动物,分别用细菌学及PCR方法评价Hp感染及其引起的胃组织炎症反应。结果表明用灌喂Hp的方法能建立早期的小鼠感染模型。 观察抗Hp多克隆牛奶抗体的体内外被动免疫保护作用。在体外,在不同的pH值下用胃蛋白酶处理免疫牛奶,再用间接ELISA法检测其抗体效价。在体内,用免疫牛奶处理小鼠模型,观察免疫牛奶的预防及治疗功效。结果显示在一定pH值范围内胃蛋白酶对IgG-Hp活性无显著影响,含抗Hp-IgG的免疫乳能预防Hp定植,降低Hp感染率,具有明显的预防Hp感染C57BL/6小鼠的作用并具有一定的治疗作用。 IgG-Hp口服所产生的被动免疫效果使得其有望应用于食品保健或各种Hp相关胃病的抗菌免疫治疗中。
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