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肠道菌群在机体健康生长及发育的过程中起着重要作用,它通过肠道黏膜免疫系统的调节与宿主建立健康的共生关系,保持肠道内稳态;由于生长速度的影响,肠道中菌群和黏膜免疫系统也会发生相应的改变,且三者间存在相关性。因此本试验首先通过研究不同生长速度的阿勒泰羊肠道菌群和黏膜免疫标志物的浓度,探讨生长速度对二者的影响以及菌群与黏膜免疫的相关性;其次通过日粮改变阿勒泰羊的生长速度,进一步研究肠道菌群和黏膜免疫标志物的变化,探讨绵羊生长发育和肠道菌群及黏膜免疫之间的关系。
根据试验设计打耳标记录300只阿勒泰羔羊初生体重,正常饲喂至6月龄时,筛选分组,将日增重在前10%的定义为生长快速组,日增重为后10%的定义为生长慢速组。两组各随机选择12只体重相近的羔羊,将生长快速组随机分为低能量水平日粮限饲组(HR)和标准能量水平日粮对照组(HC);生长慢速组随机分为高能量水平日粮饲喂组(LA)和标准能量水平日粮对照组(LC),每组各6只。HR、HC、LC和LA组分别饲喂能量摄入为营养需要量75%、100%、100%和125%的日粮。每日早晚各饲喂一次,自由饮水,预饲7天后,记录初始体重,后连续饲喂试验30天。称取饲喂后体重,采集血清检测激素和免疫标志物浓度;屠宰后采集相同部位的肠内容物提取DNA,使用IlluminaMiseq测序平台进行检测;采集肠段组织和肠黏膜黏液,检测免疫标志物浓度;最后对菌群和免疫标志物进行相关性分析。结果如下:
1.同一饲喂标准下,不同生长速度的阿勒泰羊肠道菌群组成有差异,HC组厚壁菌门、放线菌门、Saccharibacteria门、消化链球菌科和双歧杆菌科物种丰度高于LC组,LC组变形菌门和拟乳菌属物种丰度高于HC组。HC组血清中IgG浓度显著高于LC组(P<0.05),IgA和IL-10浓度极显著高于LC组(P<0.01),IL-2、IL-6和TNF-α浓度极显著低于LC组(P<0.01);HC组肠道组织中IL-2浓度显著低于LC组(P<0.05)。在菌群与免疫标志物的相关性分析中,得到与免疫标志物有显著相关性的菌群主要有克里斯滕森菌属、瘤胃菌属、拟乳菌属、Turicibacter属和迷踪菌属。
2.在日粮影响生长速度试验中,抑制生长速度后,肠道中厚壁菌门、软壁菌门和拟杆菌门丰度升高,变形菌门、放线菌门和拟乳菌属丰度降低;血清中IL-2、IL-6、IL-12和TNF-α浓度极显著升高(P<0.01),IgA、IgG和IL-10浓度极显著降低(P<0.01);肠道组织中IL-2浓度极显著升高(P<0.01)。促进生长速度后,肠道中厚壁菌门、黏胶球形菌门、拟乳菌属和普雷沃氏菌属丰度升高,变形菌门和琥珀酸菌属丰度降低,血清中TNF-α浓度显著升高(P<0.05),IL-12浓度极显著升高(P<0.01),IgG浓度显著降低(P<0.05);肠道组织中IL-2浓度显著降低(P<0.05)。
结果表明,不同生长速度的阿勒泰羊肠道菌群组成有差异;生长快速组机体免疫系统功能优于生长慢速组;肠道菌群与机体免疫标志物之间呈现显著相关性。日粮饲喂试验结果表明,不论体重增加或降低,厚壁菌门、拟杆菌门、消化链球菌科的物种丰度均升高,蓝藻门丰度降低,机体免疫功能均有所降低。结合本研究试验结果可得出,高丰度的拟乳菌属均存在于生长速度较慢的分组中,高丰度的Saccharibacteria门存在生长速度较快的组中,初步推测它们与生长速度有相关性。综上可得,生长速度与肠道菌群和黏膜免疫三者间存在相关性。
根据试验设计打耳标记录300只阿勒泰羔羊初生体重,正常饲喂至6月龄时,筛选分组,将日增重在前10%的定义为生长快速组,日增重为后10%的定义为生长慢速组。两组各随机选择12只体重相近的羔羊,将生长快速组随机分为低能量水平日粮限饲组(HR)和标准能量水平日粮对照组(HC);生长慢速组随机分为高能量水平日粮饲喂组(LA)和标准能量水平日粮对照组(LC),每组各6只。HR、HC、LC和LA组分别饲喂能量摄入为营养需要量75%、100%、100%和125%的日粮。每日早晚各饲喂一次,自由饮水,预饲7天后,记录初始体重,后连续饲喂试验30天。称取饲喂后体重,采集血清检测激素和免疫标志物浓度;屠宰后采集相同部位的肠内容物提取DNA,使用IlluminaMiseq测序平台进行检测;采集肠段组织和肠黏膜黏液,检测免疫标志物浓度;最后对菌群和免疫标志物进行相关性分析。结果如下:
1.同一饲喂标准下,不同生长速度的阿勒泰羊肠道菌群组成有差异,HC组厚壁菌门、放线菌门、Saccharibacteria门、消化链球菌科和双歧杆菌科物种丰度高于LC组,LC组变形菌门和拟乳菌属物种丰度高于HC组。HC组血清中IgG浓度显著高于LC组(P<0.05),IgA和IL-10浓度极显著高于LC组(P<0.01),IL-2、IL-6和TNF-α浓度极显著低于LC组(P<0.01);HC组肠道组织中IL-2浓度显著低于LC组(P<0.05)。在菌群与免疫标志物的相关性分析中,得到与免疫标志物有显著相关性的菌群主要有克里斯滕森菌属、瘤胃菌属、拟乳菌属、Turicibacter属和迷踪菌属。
2.在日粮影响生长速度试验中,抑制生长速度后,肠道中厚壁菌门、软壁菌门和拟杆菌门丰度升高,变形菌门、放线菌门和拟乳菌属丰度降低;血清中IL-2、IL-6、IL-12和TNF-α浓度极显著升高(P<0.01),IgA、IgG和IL-10浓度极显著降低(P<0.01);肠道组织中IL-2浓度极显著升高(P<0.01)。促进生长速度后,肠道中厚壁菌门、黏胶球形菌门、拟乳菌属和普雷沃氏菌属丰度升高,变形菌门和琥珀酸菌属丰度降低,血清中TNF-α浓度显著升高(P<0.05),IL-12浓度极显著升高(P<0.01),IgG浓度显著降低(P<0.05);肠道组织中IL-2浓度显著降低(P<0.05)。
结果表明,不同生长速度的阿勒泰羊肠道菌群组成有差异;生长快速组机体免疫系统功能优于生长慢速组;肠道菌群与机体免疫标志物之间呈现显著相关性。日粮饲喂试验结果表明,不论体重增加或降低,厚壁菌门、拟杆菌门、消化链球菌科的物种丰度均升高,蓝藻门丰度降低,机体免疫功能均有所降低。结合本研究试验结果可得出,高丰度的拟乳菌属均存在于生长速度较慢的分组中,高丰度的Saccharibacteria门存在生长速度较快的组中,初步推测它们与生长速度有相关性。综上可得,生长速度与肠道菌群和黏膜免疫三者间存在相关性。