交感神经对小鼠早期胚胎发育影响及作用机制的研究

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在哺乳动物精卵结合形成合子至发育成熟、分娩过程中,约有40%~60%的胚胎发生死亡,其中早期胚胎死亡占67%。早期胚胎死亡不仅对畜牧业养殖造成极大的经济损失,而且对妊娠妇女造成严重的身体和心理伤害,甚至引发社会问题。报道认为约有70%的早期胚胎丢失是“神经—免疫—内分泌”网络紊乱造成的,但对其具体的作用机制还不清楚。本实验旨在从交感神经的角度揭示神经对妊娠的调控机制,为全面揭示神经—内分泌—免疫网络调控妊娠发生和发展的作用机理提供基础资料。为此,采用昆明白小鼠腹腔注射不同剂量的交感神经阻断剂6—OHDA(0mg/kg体重、50mg/kg体重、100mg/kg体重),建立合适的交感神经损毁动物模型;然后利用光镜组织学技术、组织化学技术、免疫组织化学技术、ELISA和细胞培养技术,检测了交感神经对妊娠早期胚胎发育的影响、子宫内膜的组织学变化、子宫局部的免疫细胞、全身细胞免疫和体液免疫的变化,以及外周血清性激素水平的影响。主要研究结果如下: 1.昆明白小鼠腹腔连续注射交感神经损毁剂6-OHDA(100mg/kg体重)5d,可以有效损毁外周交感神经。 2.交感神经损毁后,对发情周期有一定的影响,但是对排卵没有明显的影响。主要降低胚胎的着床数,胚胎着床率减少约64.4%,而且阻滞妊娠早期胚胎的发育。 3.交感神经损毁后,妊娠早期子宫内膜腺体发育不良,血管匮乏。 4.交感神经抑制着床期肥大细胞的数量和组织胺的释放。交感神经损毁后妊娠早期子宫内肥大细胞数量在着床期明显升高(P<0.01),子宫组织中组织胺含量明显升高(E3除外)。 5.交感神经损毁后妊娠早期子宫CD8+T细胞明显增加,尤其在着床期(E5)升高了10倍,妊娠早期子宫组织中细胞因子IL-2含量升高,尤其E5升高最明显,达3.6倍,但是CD4+T细胞和细胞因子IL-4升高不明显,导致CD4+/CD8+比值下降,IL-2/IL-4比值升高,破坏了CD4+/CD8+和IL-2/IL-4之间的平衡。 6.交感神经损毁后脾脏中T、B淋巴细胞增殖能力下降;但是腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力增强。 7.交感神经损毁后,妊娠早期外周血清中雌二醇浓度在着床前(E3)升高明显,着床期下降;血清中孕酮浓度着床前升高,着床后降低。 结论:交感神经不仅通过促进子宫组织结构的发育以适应妊娠发生、发展需要,而且选择性抑制子宫局部的免疫细胞数量和活性,调控辅助性T淋巴细胞因子的分泌平衡;另一方面,交感神经通过调控妊娠早期外周血性激素的生理水平,从而维持妊娠的发生,促进妊娠早期胚胎的发育。
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