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第一部分氧化低密度脂蛋白和丹参酮ⅡA对THP-1巨噬细胞炎症因子的影响目的:探讨ox-LDL和丹参酮ⅡA刺激THP-1巨噬细胞的作用浓度和时间。方法:0ug/mL、10ug/mL、20ug/mL、40ug/mL ox-LDL刺激THP-1巨噬细胞24h或20ug/mL ox-LDL处理THP-1巨噬细胞不同时间(0h,12h,24h,48h),ELISA检测IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平;使用0uM、5uM、10uM、20uM丹参酮ⅡA刺激THP-1巨噬细胞24h或10uM丹参酮ⅡA处理THP-1巨噬细胞不同时间(0h,12h,24h,48h),观察IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平。结果:ox-LDL处理THP-1巨噬细胞显著增加IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平(P<0.05),具有一定的时间、浓度依赖性,其中20ug/mL ox-LDL作用24h时IL-1β、IL-6、TNF-α表达量变化较显著,作为后续研究反应浓度;丹参酮ⅡA处理THP-1巨噬细胞显著降低IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平(P<0.05),呈现一定的时间、浓度依赖性,其中10uM丹参酮ⅡA作用24h时IL-1β、IL-6、TNF-α表达量变化较显著,作为后续研究反应浓度。结论:ox-LDL可促进THP-1巨噬细胞的炎症反应,而丹参酮ⅡA可显著抑制THP-1巨噬细胞的炎症反应,从而发挥抗动脉粥样硬化的作用,其中10uM丹参酮ⅡA作用24h效果显著。第二部分丹参酮ⅡA通过下调THP-1巨噬细胞中的mi R-33抑制ox-LDL诱导的促炎反应目的:丹参酮ⅡA在ox-LDL刺激THP-1巨噬细胞分泌促动脉粥样硬化细胞因子的作用机制。方法:不同浓度(0ug/m L、10ug/m L、20ug/m L或40ug/m L)ox-LDL刺激THP-1巨噬细胞或者使用20ug/m L ox-LDL刺激T HP-1巨噬细胞0h、12h、24h、48h,q RT-PCR检测mi R-33表达水平;不同浓度(0u M、5u M、10u M或20u M)丹参酮ⅡA刺激ox-LDL诱导的THP-1巨噬细胞24h或者10u M丹参酮ⅡA刺激0h、12h、24h、48h,观察mi R-33的表达水平;THP-1巨噬细胞中转染anti-NC、anti-mi R-33,q RT-PCR观察转染效果,ELISA检测下调mi R-33对细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α表达量的影响;并且观察丹参酮ⅡA与过表达mi R-33对IL-1β、IL-6、TNF-α表达量的影响。结果:ox-LDL处理THP-1巨噬细胞显著增加mi R-33表达水平(P<0.05),具有一定的时间、浓度依赖性;丹参酮ⅡA处理THP-1巨噬细胞显著降低mi R-33表达水平(P<0.05),呈现一定的时间、浓度依赖性;与anti-NC组相比,anti-mi R-33可显著抑制mi R-33的表达量(P<0.05),降低ox-LDL诱导的THP-1巨噬细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α表达量(P<0.05);过表达mi R-33和丹参酮ⅡA联合作用显著逆转丹参酮ⅡA对ox-LDL诱导的THP-1巨噬细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α表达量的抑制作用。结论:丹参酮ⅡA通过下调THP-1巨噬细胞中mi R-33的表达来抑制ox-LDL诱导的促炎细胞因子的分泌,提示丹参酮ⅡA可能通过靶向mi R-33、降低促炎反应来发挥其动脉粥样硬化保护作用。