论文部分内容阅读
根结线虫(Meloidogyne spp.)是危害黄瓜栽培的一种病原物,在我国,南方根结线虫(Meloidogyne incognita)为危害生产的主要线虫种类。目前,现有的黄瓜种质资源中,仅甜瓜属野生种酸黄瓜(Cucumis hystrix Chakr.,2n=24)和普通栽培黄瓜(Cucumis sativus L.,2n=14)种间杂交后代—黄瓜/酸黄瓜渐渗系中具有抗南方根结线虫的材料。因此,明确此黄瓜/酸黄瓜渐渗系材料的抗病遗传规律、挖掘控制抗性性状的目标基因、以及探索其相关抗性机制对于黄瓜抗线虫研究具有深远的意义。本论文中,主要从组织病理结构和激素调控抗性信号途径两个方面对抗病黄瓜/酸黄瓜渐渗系材料的抗性机制进行研究;并利用抗病和感病的黄瓜/酸黄瓜渐渗系所构建的F2分离群体,对抗病遗传规律和初步定位抗病基因进行了分析。主要研究结果如下:1.抗南方根结线虫病黄瓜/酸黄瓜渐渗系根系组织病理学研究以抗病黄瓜/酸黄瓜渐渗系10299FA,对照感病栽培黄瓜‘北京截头’为试材,接种南方根结线虫后3d、6d、9d、12 d、5 d、22 d取根系进行观察。结果显示:接种后3 d,10299FA和‘北京截头’根尖均产生过敏反应;接种后6 d,在10299FA和‘北京截头’根系上发现膨大的根结,两者根结数和根结大小差异不显著;但随着接种天数增加,10299FA所形成的根结数显著少于‘北京截头’。对各时期横径最大的根结进行石蜡切片观察发现,10299FA巨型细胞位于薄壁细胞层,数量少,体积小,周围大量的细胞在接种后6d呈延伸状和空洞化;‘北京截头’巨型细胞位于维管束附近,数量多,体积大,周围部分细胞在接种后9d开始出现空洞化,且易形成重根结。2.抗南方根结线虫病黄瓜/酸黄瓜渐渗系激素调控相关基因表达分析以抗南方根结线虫病黄瓜/酸黄瓜渐渗系10299FA、对照感病黄瓜栽培种‘北京截头’为试材,运用荧光定量PCR技术分析抗感材料接种南方根结线虫后不同时间(0 d、 3d、6d、9d、12 d、15 d)根系中水杨酸、茉莉酸、乙烯合成途径相关基因的表达特征。结果显示:控制水杨酸和茉莉酸合成的相关基因PAL、ICS、LOX、AO在10299FA中接种后持续上调表达,接种后9d起各基因表达量显著高于感病“北京截头”;而控制乙烯合成的ACO基因在10299FA中表达量显著低于“北京截头”3.黄瓜/酸黄瓜渐渗系抗南方根结线虫病QTLs初步定位以抗南方根结线虫病黄瓜/酸黄瓜渐渗系10299FA为母本,感病黄瓜/酸黄瓜渐渗系10299FC为父本,构建了大小为344株的F2分离群体,通过人工接种南方根结线虫后,统计F2群体各单株的病级指数;并利用995对SSR标记筛选两亲本,然后选择在双亲间表现出多态性的分子标记筛选F2群体。结果表明:黄瓜/酸黄瓜渐渗系抗南方根结线虫病属于“主基因-多基因混合遗传模型”。联合F2群体单株的表型和基因型数据,采用JoinMap4.0软件构建连锁群,MapQTL软件对南方根结线虫抗性基因进行QTL定位分析,在六号染色体上检测到一个贡献率达28.5%的QTL位点。