不同频率电针“内关”对心肌缺血模型大鼠相关经穴皮肤血流量与相关分子(NOS/NO/CaM)变化的研究

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目的:(1)心肌不同状态对相关经穴皮肤血流量的影响通过对比观测心肌正常态、心肌缺血损伤病理态和不同频率电针干预态时相关经穴和相关经穴皮肤血流量的变化,阐释心肌缺血损伤时相关经穴皮肤血流量变化的规律和穴位出现皮肤血流量变化的特异性;探寻不同频率电针在改善心肌缺血损伤时对经穴皮肤血流量影响的规律特征。(2)心肌不同状态对相关经穴交感神经相关分子(NOS/NO/CaM)的影响通过对比检测心肌正常态、心肌缺血损伤病理态和不同频率电针干预态时相关经穴和非相关经穴皮肤组织中交感神经相关分子(NOS/NO/CaM)的差别,阐释心肌缺血损伤时相关经穴皮肤交感神经相关分子(NOS/NO/CaM)变化的规律性和穴位特异性;探寻不同频率电针在改善心肌缺血损伤时对经穴皮肤交感神经相关分子(NOS/NO/CaM)的调节作用。材料和方法:将空腹体重210-230g,雄性,Wistar大鼠50只,随机分为5组,正常组10只、假手术组10只(用于测量皮肤血流)、模型组10只、高频电针组10只和低频电针组10只。采用肢体Ⅱ导ECG检测造模前、造模后即刻、10min、30min以及电针干预后即刻、10min、30min的各组大鼠ECG情况;采用激光多普勒血流灌注成像仪(PIM)动态观测造模前、造模后即刻10min、30min以及电针干预后即刻、10min、30min的经穴皮肤血流平均灌注量,观测穴位有“内关”、“郄门”“天泉”、“足三里”、“足三里”外上方2mm处的非经非穴;在观测结束后提取经穴皮肤组织,分别采用酶联免疫吸附试验检测CaM含量,硝酸还原酶法测定NO代谢产物硝酸盐NO-3和NO-2的含量,间接反映NO的含量,比色法检测NOS活性,检测的穴位为“内关”、“郄门”、“天泉”、“外关”和“足三里”结果:(1)大鼠心肌缺血后,ECG中J点差值在电针干预后30min时最大;低频电针干预可明显降低J点差值,高频电针干预组即刻效果不及低频电针组,但其起效的潜伏期较长;(2)大鼠心肌缺血后,其左侧心包经脉“内关”和“大泉”穴区皮肤血流平均灌注量明显升高,右侧胃经“足三里”穴区皮肤血流平均灌注量明显降低;高低频电针干预后不同时间点左侧心包经“内关”和“天泉”穴区皮肤血流平均灌注量分别都显著下降,并向正常水平恢复,低频电针刺激较高频电针刺激差异更明显;低频电针刺激后l0min“郄门”穴区皮肤血流平均灌注量显著下降,低频电针刺激后10min"足三里”穴区皮肤血流平均灌注量显著上升;(3)大鼠心肌缺血后,双侧心包经“内关”、“天泉”、“郄门”,相表里经“外关”和胃经“足三里”穴区NO含量和NOS活性水平均显著降低;心包经脉“内关”、“天泉’和胃经“足三里”穴区CaM含量显著升高;高频电针刺激“内关”后,“内关”、“天泉”和“郄门”穴区NO含量显著升高,“内关”、“外关”和“足三里”穴区NOS活性水平明显增强;低频电针干预后“内关”、“天泉”和“足三里”穴区CaM含量显著下降,高频电针干预后“天泉”和“足三里”穴区CaM含量显著下降。结论:(1)心肌缺血损伤时间越长对心脏功能影响越大,低频电针组在改善心脏功能的早期效果优于高频电针组,但是高频电针的后期效应显得有优势;(2)心肌缺血大鼠左侧心包经脉穴区皮肤血流平均灌注量较右侧胃经“足三里”穴位具有腧穴特异性变化,高低频电针刺激“内关”穴,在抗心肌缺血损伤时对经穴皮肤血流平均灌注量的影响表现出频率特异性,其中低频电针效果较好;(3)心包经上3个穴位、表里经“外关”穴、多气多血经脉“足三里”穴区NO含量、NOS活性水平的变化与心肌缺血都有关联,高频电针对心肌缺血损伤状态相关穴区NO含量和NOS活性水平的特异性上调作用较低频电针更加明显;心包经脉”内关”、“天泉”、多气多血经脉“足三里”穴区CaM含量的变化与心肌缺血关联性更大,低频和高频电针在调节“内关”、“天泉”和“足三里”穴区CaM含量下降方面无明显频率差异性。
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