耐力运动对老年小鼠心肌T-钙粘蛋白的影响及其心肌保护效应研究

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bright_wish
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目的:通过探讨耐力运动对老年小鼠心肌组织T-钙粘蛋白及其配体脂联素和下游相关蛋白分子表达的影响,阐明耐力运动对老龄心肌保护作用的机制及探讨T-钙粘蛋白在其中的价值。方法:本实验分为两部分,第一部分探讨耐力运动对老年小鼠心肌组织T-钙粘蛋白表达及脂联素/T-钙粘蛋白/AMPK级联的影响。将30只17月龄C57雄性老年小鼠随机分为老年运动组及老年对照组,每组各15只。老年运动组进行12周耐力运动,老年对照组采取常规饲养,无运动干预,另取15只2月龄C57雄性小鼠纳入为青年对照组,常规饲养,无运动干预。采用免疫组化法观测老年运动组,老年对照组及青年对照组小鼠心肌组织T-钙粘蛋白及其配体脂联素的分布和阳性表达,采用免疫印迹检测心肌组织T-钙粘蛋白、脂联素的蛋白表达及AMPK磷酸化水平。第二部分探讨耐力运动对老年小鼠心肌的保护作用。采用免疫印迹检测三组小鼠心肌组织促凋亡蛋白分子Bax、Caspase-9,抑凋亡蛋白分子Bcl-2的表达;采用免疫组化观测各组心肌组织抑自噬蛋白p-mTOR的细胞定位和阳性表达,免疫印迹检测促自噬蛋白Beclin-1的表达,抑自噬蛋白mTOR的活化水平;免疫印迹检测各组心肌组织纤维化相关蛋白TGF-β1、CollagenⅠ、CollagenⅢ的表达,天狼猩红染色观察各组心肌纤维化程度。结果:T-钙粘蛋白定位于心肌细胞胞膜及血管内皮,脂联素定位于心肌细胞胞膜、胞浆及血管内皮;免疫组化及免疫印迹结果均显示,老年对照组与青年对照组相比,心肌组织T-钙粘蛋白、其配体脂联素的表达显著下调(P<0.05),免疫印迹结果示AMPK活化水平显著下调(P<0.05);而经12周耐力运动训练后,老年运动组与老年对照组相比,T-钙粘蛋白、脂联素的表达,AMPK活化水平显著升高(P<0.05)。与青年对照组相比,老年对照组的小鼠心肌组织抑凋亡蛋白bcl-2表达显著下调,促凋亡蛋白bax、Caspase-9表达显著上调(P<0.05);老年运动组与老年对照组相比,心肌组织抑凋亡蛋白bcl-2表达显著上调,促凋亡蛋白bax、Caspase-9表达显著下调(P<0.05)。老年对照组与青年对照组小鼠相比,心肌组织抑自噬蛋白mTOR活化水平显著上调,促自噬蛋白Beclin-1表达显著下调(P<0.05);老年运动组与老年对照组相比,心肌组织抑自噬蛋白mTOR活化水平显著下调,促自噬蛋白beclin-1表达显著上调(P<0.05)。老年对照组与青年对照组相比,纤维化相关信号蛋白TGF-β1、CollagenⅠ、CollagenⅢ表达显著上调(P<0.05),心肌纤维化程度加重,而经过12周耐力运动后,老年运动组与老年对照组小鼠相比,心肌组织纤维化相关信号蛋白TGF-β1、CollagenⅠ、CollagenⅢ表达显著下调(P<0.05),纤维化程度减轻。结论:耐力运动可增强老年小鼠心肌T-钙粘蛋白表达,促进其配体脂联素与心肌组织结合,刺激AMPK活化,影响下游凋亡、自噬、纤维化相关信号蛋白的表达从而实现对老龄心肌的保护作用。
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