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第一部分载抗痨药类骨磷灰石/聚氨基酸缓释载体人工骨的体外性能研究目的研究载抗痨药类骨磷灰石/聚氨基酸缓释载体人工骨对结核分枝杆菌的体外作用,研究其对结合分支杆菌MTB H37Rv毒株感染MG 63细胞增殖分化的作用及其作用机制。方法将MTB H37Rv毒株与载抗痨药类骨磷灰石/聚氨基酸缓释载体人工骨共培养,检测细菌增长指数。将复合物与MTB H37Rv毒株感染的MG 63细胞共培养,通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)检测、MTT实验和蛋白印迹(Western blot)实验检测细胞增殖、分化情况。结果载抗痨药类骨磷灰石/聚氨基酸缓释载体人工骨组的细菌生长指数明显低于空白对照组,差异有统计学意义(p<0.05)。MTT实验发现载抗痨药类骨磷灰石/聚氨基酸缓释载体人工骨组的OD值与对照组相比,差异有统计学意义(p<0.05)。载抗痨药类骨磷灰石/聚氨基酸缓释载体人工骨组的ALP活性、Runx2及OCN表达水平高于对照组,差异有统计学意义(p<0.05),Wnt1、Lrp6和β-catenin蛋白的表达水平的差异有统计学意义(p<0.05)。结论载抗痨药类骨磷灰石/聚氨基酸缓释载体人工骨在体外可有效抑MTB H37Rv毒株生长。载抗痨药类骨磷灰石/聚氨基酸缓释载体人工骨可促进MTB H37Rv感染的MG 63细胞的增殖、分化,Wnt/β-catenin信号通路可能是其发挥作用的重要机制。第二部分载抗痨药类骨磷灰石/聚氨基酸缓释载体人工骨的体内释放及生物相容性研究目的研究载抗痨药类骨磷灰石/聚氨基酸缓释载体人工骨的体内释放及生物相容性,为后续研究及其临床试用提供前期实验基础。方法建立新西兰大白兔股骨髁骨缺损模型,植入载抗痨药类骨磷灰石/聚氨基酸缓释载体人工骨。预设时间点取样,采用高效液相色谱法检测血液中及局部肌肉组织中的利福喷丁药物浓度。通过苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)及检测血生化指标评估载抗痨药类骨磷灰石/聚氨基酸缓释载体人工骨对实验动物心脏、肝脏及肾脏的影响。结果载抗痨药类骨磷灰石/聚氨基酸缓释载体人工骨可在体内持续释放药物,尽管植入术1周后不能在血浆中检出利福喷丁药物,但局部肌肉组织中可持续检测出高于最低抑菌浓度的药物,其时间达12周。在植入术后12周,载抗痨药类骨磷灰石/聚氨基酸缓释载体人工骨几乎完全降解、吸收。HE染色未发现心脏、肝脏及肾脏组织细胞坏死改变。与对照组相比,载抗痨药类骨磷灰石/聚氨基酸缓释载体人工骨组的谷丙转氨酶、谷草转氨酶、血尿素氮和肌酐水平,差异无统计学意义(p>0.05)。结论本实验表明载抗痨药类骨磷灰石/聚氨基酸缓释载体人工骨可与体内缓慢持续地释放利福喷丁药物,并对心脏、肝脏及肾脏无明显毒副作用。且载抗痨药类骨磷灰石/聚氨基酸缓释载体人工骨可逐渐降解吸收,并促进新骨的形成。本研究为载抗痨药类骨磷灰石/聚氨基酸缓释载体人工骨在骨关节结核治疗中应用提供进一步实验基础。