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生物表面活性剂是微生物在一定条件下培养时产生的一类具有表面活性的生物大分子物质。与化学表面活性剂相比,生物表面活性剂除了具有良好的降低油水界面张力、乳化、发泡和消泡的性能外,还具有易生物降解、对环境无毒害等优点,因而在环境污染治理和提高原油采收率等方面得到了广泛应用。本研究从石油污染土壤中分离得到一株生物表面活性剂产生菌BSFD5,根据其生理生化特征和16S rRNA基因序列相似性分析,将该菌株鉴定为铜绿假单胞菌。菌株BSFD5的发酵液经过初步分离、提纯得到生物表面活性剂粗品,产量为4.06g/L,CMC值为50 mg/L。经过FT-IR分析测定并结合相关文献报道,初步判定菌株BSFD5产物为鼠李糖脂。对其乳化特性进行研究表明,BSFD5发酵液的乳化性能稳定,增溶效果良好。考察了不同环境因子对菌株P. aeruginosa BSFD5的生长和产鼠李糖脂的影响。当以葡萄糖和菜籽油(1：1)为碳源,以NaN03为氮源,C/N为15时,产脂量最高,达5.21g/Lo在温度为30℃,pH6～7,250 mL三角瓶装液量为25-100 mL之间时,菌株生长和产脂情况良好。Fe2+、Ca2+对菌株的生长和产脂有促进作用,而Zn2+则有明显的抑制作用。采用以sacB基因为反筛选标记的同源重组载体,将鼠李糖基转移酶基因hlABRI整合到恶臭假单胞菌的模式菌株KT2440的染色体上,构建了遗传稳定、不含外源抗性基因的可产生鼠李糖脂的工程菌株KT2440-rhABRI,并通过PCR的方法验证了同源重组事件的发生。在实验室模拟条件下,初步研究了K72440-rhABRI对土壤中芘降解的影响。结果表明,在土壤温度20℃-40℃,pH6.0～8.0的范围内,KT2440-rhABRI可促进土著微生物对芘的降解,接种量多少与降解率呈一定的正相关性。土壤中的土著微生物可对低浓度的芘具有较好的降解效果,添加了基因工程菌后降解效果更为显著,而对高浓度则无明显效果。这些结果为工程菌在生物修复中的应用奠定了基础。