研究背景：　　急性缺血性心脏病是由于冠状动脉粥样硬化引起的冠脉循环的急性改变，导致血流和心肌需求之间不平衡造成的心肌损害，心肌细胞短时间内大量凝固性坏死，严重者可导致心肌梗塞，若发展成慢性则会由于长期的供血不足使得心肌组织发生萎缩，残余心肌无法重建坏死组织，心功能随时间进行性恶化。近年来该病在我国的发病率逐年升高，居各类心脏病之首。　　由于血供不足是该病的发病基础，缺血性心脏病的治疗应尽快恢复血流灌注，常用方法有系统性药物溶栓、经皮冠状动脉溶栓术、冠状动脉旁路搭桥术和其它外科手术等。另外，血管新生可以有效改善微循环，缓解供血不足，刺激血管新生可以治疗缺血性心脏病。　　国外研究发现，对犬乳内动脉进行低强度超声照射后，大动脉直径可见明显扩张20 %左右，且低强度超声联合微泡可有效改善缺血骨骼肌的血流灌注，可能机制为超声的空化作用对血管壁机械性刺激产生了一氧化氮等扩张血管的相关因子，最终导致血管扩张。超声扩张血管效应可用于治疗缺血性疾病，尤其在缺血性心脏病的治疗中，可以通过侧枝血管扩张缓解患者病情，改善缺血心肌缺血缺氧状态，使缺血心肌部分恢复血供，提高缺血性心脏病患者的治愈率。因此本研究通过结扎左冠状动脉前降支建立大鼠急性心肌缺血的动物模型，并采用新型可调控空化参数的诊断治疗一体机，通过超声（单独或联合微泡）刺激缺血区域，探讨诊断级超声对急性缺血心肌的改善作用以及不同超声机械指数对其改善作用的区别。　　目的：　　1、探讨改进的诊断超声对大鼠急性心肌缺血左心收缩功能的改善作用；　　2、探讨不同参数诊断超声单独与联合微泡对急性心肌缺血大鼠左心收缩功能的改善作用的区别。　　材料与方法：　　1. 实验材料　　（1）仪器设备　　动物呼吸机：ALC-V8（吉安得尔科技有限公司，北京），本实验所用呼吸频率：60次/分，呼吸比: 1∶1，潮气量：2-3 mL。　　超声治疗仪：飞依诺VINNO70 彩色多普勒超声仪（飞依诺科技有限公司，苏州），配有X4-12L高频线阵探头，发射频率范围4~12 MHz。该仪器具有调控微泡超声空化功能(即 VFLASH)，并且具有自适应可变焦域感兴趣区的弱聚焦式超声发射功能。本实验采用该仪器的VFLASH功能将整个心脏置于感兴趣区（Region of interest，ROI）区进行照射，治疗脉冲中心频率4 MHz，脉冲重复频率（Pulse repetition frequency， PRF）20 Hz，各治疗组照射脉冲宽度分别为5个周期和18个周期，对应的机械指数（MI）分别为1.4和0.7，各治疗组超声脉冲照射时间为1.2秒，脉冲间隔时间为2秒，总治疗时间长为20 分钟。　　超声成像系统：Vevo 2100型高频高分辨率小动物超声成像系统（VisualSonics FujiFilm公司，加拿大）：所配MS250高频线阵探头（中心频率18 MHz），具备M型超声心动图成像，实时彩色多普勒血流成像、心脏舒缩功能测量分析、频谱多普勒血流检测、二次谐波超声造影成像等功能。　　（2）实验动物　　健康成年雄性SD大鼠200只，体重200 g±10 g，由陆军军医大学新桥医院动物实验中心提供，饲养程度为清洁级。　　（3）实验试剂：　　超声造影剂微泡：陆军军医大学新桥医院超声科自制“脂氟显”脂质包膜微泡超声造影剂，浓度约（4~10）×109/mL，核心气体为全氟丙烷，平均粒径2μm，采用高速振荡90 s制成脂质微泡待用。本实验中将0.1 mL微泡原液稀释于10 mL 9%生理盐水中，稀释后浓度约（4~10）×107/mL。　　水合氯醛：TCA，国药集团化学试剂有限公司，上海。用无菌生理盐水配制成浓度为10 %的溶液。　　注射用青霉素：8×105 U/支。　　4%多聚甲醛固定液：Boster生物工程有限公司，武汉。　　2. 实验方法　　（1）大鼠急性心肌缺血动物模型的建立：健康成年SD大鼠200只，雄性，体重约200 g（陆军军医大学新桥医院动物实验中心提供，符合实验动物福利伦理要求）。待腹腔注射10 %水合氯醛溶液麻醉后，将其仰卧固定四肢及上齿于实验台，直视下经口腔进行气管插管，验证插管成功后即连接呼吸机并设置参数：呼吸次数 60 次/分，呼吸比1∶1，潮气量2-3 mL。左侧胸部备皮消毒，于第四肋间剪开皮肤，逐层钝性分离皮下组织及肌肉，开胸后使用肋骨撑开器充分暴露心脏。以左冠状动脉为标志结扎左冠状动脉前降支，结扎前于心脏表面滴1-2滴盐酸利多卡因注射液以预防心律失常。当观察到心脏表面发白，运动减弱，初步提示结扎成功。关闭胸腔，逐层缝合至皮肤。手术完成后即刻行 M 型超声心动图测量大鼠左心收缩功能，随后尾静脉团注 0.1mL脂氟显并用 VINNO70 高频探头进行超声造影（CEUS），CEUS 结果显示左室前壁及心尖部心肌缺血造影增强缺损，证明急性心肌缺血大鼠模型建立成功。建模成功者术后肌注青霉素溶液，每天2次，每次20万U，连续3天。　　（2）改进的诊断超声联合微泡对大鼠急性心肌缺血的治疗：将建模成功大鼠随机分为以下5组：单纯超声照射组包括高机械组（HMI，MI1.4，n=11）和低机械指数组（LMI，MI0.7，n=17），高机械指数联合微泡组（HMB，MI1.4，n=15,）和低机械指数联合微泡组（LMB，MI0.7，n=16），空白对照组（n=11）。于建模术后24h、72h、96h按照实验方案进行处理，各组超声照射时间均为20 分钟，联合微泡组经尾静脉缓慢匀速推注1 mL浓度为1%的脂氟显微泡。术后第28天统计各组大鼠存活数量，并在超声心肌造影进行左心室内膜勾画的辅助下测量左心室射血分数（EF）。结束后取心脏标本进行HE染色，以28天为终止目标对各组鼠的存活率以及各组鼠的平均 EF作统计学分析。　　结果：　　（1）大鼠急性心肌缺血模型的建立：结扎左冠状动脉前降支后作左心室超声造影，显示左室心尖部心肌充盈缺损即造模成功。参与建模大鼠总共200只，成功者70只，建模成功率35%。　　（2）大鼠急性心肌缺血模型的治疗：建模28天后各组鼠存活数量如下：HMI组8只，LMI组8只，HMB组3只，LMB组8只，对照组9只。仅HMI组的存活率明显高于HMB组，差异有统计学意义（x2=5.23，P＜0.05）；左心收缩功能，HMI组（EF 87.71±4.69%）及LMI组（EF 78.04±7.35%）平均EF均较空白对照组（EF 64.97±9.37%）高，差异均具有统计学意义（P＜0.01，P＜0.02），HMI组平均EF高于LMI组，差异具有统计学意义（P＜0.01），LMI组与LMB组间平均EF差异无统计学意义（P＞0.05）。　　结论：　　（1）改进的诊断超声脉冲联合微泡作用可以改善急性心肌缺血大鼠的左室收缩功能；　　（2）高机械指数（MI=1.4）诊断级低强度超声较低机械指数（MI=0.7）诊断超声改善急性心肌缺血大鼠左室收缩功能更为明显。