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第一章:NAcPGP在吸烟人群体内的表达目的:探讨NAcPGP在血液中的表达水平是否可以提示吸烟人群罹患COPD的风险实验方法1.研究对象本研究分为三组:吸烟COPD人群组50例、吸烟健康人群组50例,非吸烟健康人群组50例。2.血液中NAcPGP的检测应用三重四极杆液质联用技术检测三组人群血液中的NAcPGP的表达水平。3数据分析与统计学处理应用SPSS13.0统计软件对数据进行统计分析。服从正态分布的计量资料应用均数±标准差(X±S)表示,三组间比较采用one-way ANOVA方差分析,方差齐,组间多重比较采用LSD检验,相关性分析采用Pearson直线相关法,以P<0.05表示差异具有统计学意义。结果1.一般情况吸烟COPD人群组、吸烟健康人群组,非吸烟健康人群组的年龄分别为(52.74±9.60)岁、(49.64±6.58)岁和(51.34±7.74)岁,三组间年龄差异无统计学意义(F=1.848P=0.161)。吸烟COPD人群组共50例,包括男性40例,女性10例:吸烟健康人群组共50例,包括男性36例,女性14例,非吸烟健康人群组共50例,包括男性42例,女性8例,三组间性别差异无统计学意义(χ2=2.225P=0.329)。2.NAcPGP在血浆中的水平吸烟COPD人群组、吸烟健康人群组,非吸烟健康人群组的血液NAcPGP的表达水平分别为(31.29±26.69)pg/m1、(18.91±7.69)pg/ml和(5.78±2.51)pg/ml,三组间差异有统计学意义(F=9.411P<0.01);吸烟COPD人群组和吸烟健康人群组组间差异有统计学意义(P=0.041),即吸烟COPD人群血液中NAcPGP的水平高于吸烟健康人群血液中NAcPGP的水平;吸烟COPD人群组和非吸烟健康人群组组间差异有统计学意义(P<0.001),即吸烟COPD人群血液中NAcPGP水平高于非吸烟健康人群;吸烟健康人群组和非吸烟健康人群组组间差异有统计学意义(P=0.021),即吸烟健康人群血液中NAcPGP的水平高于非吸烟健康人群血液中NAcPGP的水平。第二章NAcPGP在AECODP的表达及与其急性炎症的关系目的:探讨NAcPGP的表达水平在AECOPD与COPD稳定期的不同。实验方法:1研究对象本研究分为三组:AECOPD组50例,COPD稳定期组50例和健康对照组50例。2.痰液中NAcPGP的检测应用三重四极杆液质联用仪技术检测三组人群痰液中的NAcPGP的表达水平。3.痰液中的MMP-8、MMP-9、MPO的检测应用ELISA技术检测三组人群痰液中的MMP-8、MMP-9、MPO的表达水平。4.中性粒细胞膜上的CXCR1和CXCR2受体的表达水平应用ELISA技术检测三组人群中性粒细胞膜上CXCRl和CXCR2的表达水平。5.炎症指标检测血常规、C反应蛋白于广东省人民医院检验科检测。6.数据分析与统计学处理应用SPSS13.0统计软件对数据进行统计分析。首先对数据进行正态性检验及方差齐性检验。服从正态分布的计量资料应用均数±标准差(X±S)表示,三组间性别比较用多个独立样本率比较的卡方检验,三组间各测量指标比较采用one-way ANOVA方差分析,检验方差齐性,若方差齐,则组间多重比较采用LSD检验,若方差不齐,组间多重比较采用Dunnett’s T3检验,相关性分析采用Pearson直线相关法,以P<0.05表示差异具有统计学意义。结果1.一般情况AECOPD组、COPD稳定期组和健康对照组的年龄分别为(61.94±8.01)岁、(64.14±9.48)岁和(61.06±7.44)岁,三组间年龄差异无统计学意义(F=1.803P=0.168)。AECOPD组共50例,包括男性40例,女性10例;COPD稳定期组共50例,包括男性33例,女性17例;健康对照组共50例,包括男性41例,女性9例,三组间性别差异无统计学意义(χ2=4.167P=0.125)。AECOPD组、COPD稳定期组和健康对照组的吸烟指数分别为(578.80±348.93)、(556.20±305.48)和(598.00±329.83),三组间吸烟指数差异无统计学意义(F=0.089P=0.915)。AECOPD组和COPD稳定期组的肺功能指标FEV1/FVC分别为(50.27±13.73)和(54.28±13.46),两组间差异无统计学意义(F=0.808P=0.372)AECOPD组和COPD稳定期组的肺功能指标FEV1%预计值分别为(49.04±19.44)和(53.05±13.31),两组间差异无统计学意义(F=3.743P=0.058)。2.NAcPGP在痰液中的水平AECOPD组、COPD稳定期组及健康对照组的痰液NAcPGP的表达水平分别为(80.86±53.18)(46.15±39.61)(8.82±5.02),三组间差异有统计学意义(F=26.420P<0.01);AECOPD组和健康对照组组间差异有统计学意义(P<0.001),即AECOPD痰液中NAcPGP的水平高于健康人痰液中NAcPGP的水平;COPD稳定期组和健康对照组组间差异有统计学意义(P=0.001),即COPD稳定期痰液中NAcPGP的水平高于健康人痰液中NAcPGP的水平;AECOPD组和COPD稳定期组组间差异有统计学意义(P=0.002),即AECOPD痰液中NAcPGP水平高于COPD稳定期。3.痰液中MMP-9的表达水平AECOPD组、COPD稳定期组及健康对照组的痰液MMP-9的表达水平分别为(17.39±4.71)(14.16±3.87)(9.73±4.98),三组间差异有统计学意义(F=21.518P<0.01);AECOPD组和健康对照组组间差异有统计学意义(P<0.01),即AECOPD痰液中MMP-9的水平高于健康人痰液中MMP-9的水平;COPD稳定期组和健康对照组组间差异有统计学意义(P<0.05),即COPD稳定期痰液中MMP-9的水平高于健康人痰液中MMP-9的水平;AECOPD组和COPD稳定期组组间差异有统计学意义(P=0.00.7),即AECOPD痰液中MMP-9水平高于COPD稳定期。4.痰液中MMP-8的表达水平AECOPD组、COPD稳定期组及健康对照组的痰液MMP-8的表达水平分别为(1041.49±395.19)(918.63±425.75)(433.48±297.82),三组间差异有统计学意义(F=21.83P<0.01);AECOPD组和健康对照组组间差异有统计学意义(P<0.05),即AECOPD痰液中MMP-8的水平高于健康人痰液中MMP-8的水平;COPD稳定期组和健康对照组组间差异有统计学意义(P<0.05),即COPD稳定期痰液中MMP-8的水平高于健康人痰液中MMP-8的水平;AECOPD组和COPD稳定期组组间差异无统计学意义(P=0.63),即尚不能认为AECOPD与COPD稳定期痰液中MMP-8水平有差别。5.痰液中MPO的表达水平AECOPD组、COPD稳定期组及健康对照组的痰液MPO的表达水平分别为(79.26±42.53)(50.28±36.32)(23.83±20.96),三组间差异有统计学意义(F=19.39P<0.01);AECOPD组和健康对照组组间差异有统计学意义(P<0.01),即AECOPD痰液中MPO的水平高于健康人痰液中MPO的水平;COPD稳定期组和健康对照组组间差异有统计学意义(P=0.012),即COPD稳定期痰液中MPO的水平高于健康人痰液中MPO的水平;AECOPD组和COPD稳定期组组间差异具有统计学意义(P=0.005),即AECOPD痰液中MPO水平高于COPD稳定期。6.中性粒细胞膜上CXCR1受体的表达水平AECOPD组、COPD稳定期组及健康对照组的中性粒细胞膜CXCR1受体的表达水平分别为(13.34±5.18)(9.77±6.10)(6.07±4.16),三组间差异有统计学意义(F=14.63P<0.01);AECOPD组和健康对照组组间差异有统计学意义(P<O.001),即AECOPD中性粒细胞膜上的CXCR1受体的表达水平高于健康人中性粒细胞膜上的CXCR1受体水平;COPD稳定期组和健康对照组组间差异有统计学意义(P=O.007),即COPD稳定期患者中性粒细胞膜上的CXCR1受体的表达水平高于健康人中性粒细胞膜上CXCR1受体的表达水平;AECOPD组和COPD稳定期组组间差异具有统计学意义(P=0.009),即AECOPD中性粒细胞膜上的CXCR1受体的表达水平高于COPD稳定期。7.中性粒细胞膜上CXCR2受体的表达水平AECOPD组、COPD稳定期组及健康对照组的中性粒细胞膜CXCR2受体的表达水平分别为(16.36±8.01)(12.84±7.60)(7.28±5.68),三组间差异有统计学意义(F=12.22P<0.01);AECOPD组和健康对照组组间差异有统计学意义(P<0.01),即AECOPD中性粒细胞膜上的CXCR2受体的表达水平高于健康人中性粒细胞膜上CXCR2受体的表达水平;COPD稳定期组和健康对照组组间差异有统计学意义(P=0.004),即COPD稳定期患者中性粒细胞膜上的CXCR2受体的表达水平高于健康人中性粒细胞膜上CXCR2受体的表达水平;AECOPD组和COPD稳定期组组间差异无统计学意义(P=0.061),即尚不能认为AECOPD和COPD稳定期中性粒细胞膜上的CXCR2受体的表达水平有差异。8.AECOPD组NAcPGP与MPO、中性粒细胞计数、白细胞计数、C反应蛋白、CXCR2、CXCRl、MMP-8、MMP-9的相关性分析AECOPD组痰液中的NAcPGP水平与MPO水平呈正相关(r=0.798P=0.021);NAcPGP水平与血常规中性粒细胞计数呈正相关(r=0.404P=0.004);NAcPGP水平与血常规白细胞计数呈正相关(r=0.438P=0.002):NAcPGP水平与C反应蛋白水平呈正相关(r=0.287P=0.046);NAcPGP水平与MMP-9水平呈正相关(r=0.616P<0.001);NAcPGP水平与MMP-8水平呈正相关(r=0.649P<0.001);NAcPGP水平与CXCR1水平呈正相关(r=0.658P<0.05);NAcPGP水平与CXCR2水平呈正相关(r=0.510P<0.05)第三章NAcPGP在鉴别AECOPD与支气管哮喘急性发作期中的意义目的:探讨NAcPGP是否可以成为鉴别AECOPD和哮喘急性发作期的生物标志物实验方法1研究对象本研究分为两组:AECOPD组50例,支气管哮喘急性发作组50例。2.痰液中NAcPGP的检测应用三重四极杆液质联用仪技术检测两组人群痰液中的NAcPGP的表达水平。3.数据分析与统计学处理应用SPSS13.0统计软件对数据进行统计分析。首先对每个因子的数据进行正态性检验及方差齐性检验。服从正态分布的计量资料应用均数±标准差(X±S)表示,两组间比较采用t检验,以P<0.05表示差异具有统计学意义。结果1.一般情况AECOPD组和支气管哮喘急性发作组的年龄分别为(61.94±8.01)岁和(65.28±5.48)岁,两组间年龄差异无统计学意义(F=3.298P=0.072)。AECOPD组共50例,包括男性40例,女性10例;支气管哮喘急性发作组共50例,包括男性42例,女性8例;两组间性别差异无统计学意义(χ2=0.271P=0.603)。2.NAcPGP在痰液中的水平AECOPD组和支气管哮喘急性发作期组的痰液NAcPGP的表达水平分别为(80.86±53.18)和(35.81±19.11),两组间差异有统计学意义(F=5.606P=0.021),即AECOPD患者痰液中NAcPGP的水平高于支气管哮喘急性发作期患者痰液中NAcPGP的水平。结论:1.NAcPGP是一种提示吸烟气道损害的早期慢性炎症标志物,可以提示吸烟者有患COPD的风险,这将有利于更早的制定治疗和预防措施,有利于说服患者尽早戒烟。2.NAcPGP作为AECOPD的急性炎症指标之一,与其他的临床指标结合起来,可以提示急性加重期患者中性粒细胞所致的气道炎症程度,更好地指导临床工作。3.在AECOPD和哮喘急性发作期患者中,因为无法行激发实验;所以NAcPGP可能成为鉴别AECOPD和哮喘急性发作期的生物标志物,具有广阔的临床应用前景。