虾类IMD基因的功能分析及抗病指标的筛选

被引量 : 4次 | 上传用户:liuyc077
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
白斑综合征病毒(white spot syndrome virus, WSSV)是危害虾类养殖业最为严重的病原,由WSSV引起的白斑综合征(white spot syndrome,WSS)的爆发给虾类养殖业造成了严重的经济损失。随着各种疾病的爆发给虾类养殖业带来越来越多的挑战,研究者们更加注意到虾类免疫学研究的重要性。对虾类免疫相关基因的研究,有助于理解虾的免疫防御机制,为病害控制提供指导;另一方面,虾类抗病指标的筛选不仅可以为合理评价虾的健康状态提供参考,同时也可为遗传育种提供指导。本论文在克隆了中国明对虾IMD基因全长cDNA的基础上研究了虾类IMD基因的功能。另外以实验室常年养殖的脊尾白虾(Exopalaemoncarinicauda Holthuis)作为WSSV感染对虾的模式动物,通过人工感染WSSV获得了对WSSV耐受的虾,比较了WSSV耐受虾和对照虾免疫酶活性的差异及耐受虾、濒死虾与对照虾基因转录水平的差异,以期筛选虾类免疫抗病相关的检测指标。主要进展如下:克隆了中国明对虾IMD基因(FcIMD)的全长cDNA序列,包含了483bp的开放阅读框,编码160个氨基酸。FcIMD与在其他虾类中报道的IMD基因具有很高的相似性。FcIMD基因在对虾不同组织中的转录水平表现出明显的差异;攻毒实验中,在细菌注射1小时后,FcIMD基因的转录出现明显的上调表达;WSSV注射的早期,FcIMD基因的转录水平出现了明显的下调,接着出现明显上调表达趋势,这表明FcIMD在病原刺激的早期发挥了重要作用。为了解虾类IMD基因与Relish、Dorsal和JNK调节的信号通路的关系,我们利用dsRNA干扰的方法研究了在FcIMD基因的表达被干扰后,FcRelish、FcDorsal、FcJNK以及不同抗菌肽基因的转录表达变化,发现Relish和不同抗菌肽的转录表达水平明显降低,而Dorsal、JNK的转录没有明显变化,由此推断IMD参与了Relish调控的信号通路。以脊尾白虾为实验材料,以人工注射WSSV后稳定存活的脊尾白虾作为WSSV耐受群体(命名为Rm),以注射PBS的虾作为对照群体(命名为Vm),以注射WSSV后发病濒死的虾作为濒死群体(命名为Am),分析比较了Rm群体和Vm群体的酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)活性。Rm群体的ACP和AKP活性均显著低于Vm群体(P<0.05),而两群体在SOD活性上无显著性差异(P0.05)。为进一步检验WSSV耐受群体是否比未经历过病毒感染的虾具有更高的抗WSSV的能力,我们以实验室养殖过程中经过WSSV自然感染并经历了WSS爆发之后存活的脊尾白虾作为抗性群体(命名为Rn),以未经历过WSSV感染的脊尾白虾作为普通群体(Vn),进行WSSV人工注射攻毒,观察它们在WSSV感染后的存活率,结果显示Rn群体攻毒后存活率为33.2%,显著高于Vn群体的存活率15.1%(P<0.05),说明经历WSS爆发后的虾确实对WSSV具有更高的耐受性,同时说明在此前提下ACP和AKP有可能作为虾类抗WSSV能力的评价指标。根据脊尾白虾在WSSV潜伏组与急性感染组比较的转录组数据,选取该转录组中差异表达的基因45条,利用定量PCR检测其在Rm群体、Vm群体以及Am群体的转录表达水平,结果发现有四个基因的表达在Vm与Am群体中有显著性差异,它们分别为:VWC结构域蛋白、磷酸丙糖异构酶、层粘连蛋白亚基、脱氢还原酶,这些基因有可能作为潜在的指示脊尾白虾健康状况的指标。
其他文献
本文以铁尾矿为主要原料,石灰石、白云石、纯碱、砂岩以及分析纯Al2O3为校正原料,CaF2为助熔剂,NaHCO3为发泡剂,采用粉末烧结法制备了多孔玻璃陶瓷。系统的研究了基础玻璃中
儿童文学拥有儿童和成人所构成的双重结构的读者群。除了作为目标读者和主体读者的儿童读者,成人读者也很重要。他们能对儿童文学进行更好的阐释、能对儿童读者的阅读进行引导
利用北京市20个测站1981~2004年的降雨资料,对比分析了几种降雨侵蚀力简易计算方法的适用性,计算了北京市不同地区的降雨侵蚀力R值,并在GIS软件支持下对所得结果进行了系统的分析
伴随着素质教育的发展和新课程改革的不断推进,要求在课堂教学定位中始终坚持以学生为主体,积极开展师生互动、生生讨论,努力改变传统模式下的学生学习方式,让学生在学习过程中能
为了合理利用油菜种质资源,降低组配油菜杂交组合的盲目性,对30份油菜骨干亲本材料的主要农艺性状和品质性状进行考察,采用11个农艺性状指标(株高、千粒质量、含油量等)进行
采用两级混凝沉淀作为PCB综合废水处理系统的物化处理工艺,在原水pH 1~5,总铜10~100 mg/L,COD 300~1000mg/L的条件下,出水水质稳定、可靠达到pH 7~8,总铜<0.3mg/L,COD <500mg
目的评价神经外科昏迷患者采用预防性护理干预对压疮发生率的影响。方法将2015年1月—2018年4月我院神经外科收治的108例昏迷患者随机分为2组,常规组54例行常规护理,干预组54
迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)是海水养殖鱼类中的重要病原菌,其所导致的迟缓爱德华氏菌病(edwardsiellasis)每年给海水养殖业造成巨大的经济损失。针对迟缓爱德华氏菌病
对废弃混凝土进行合理再生利用,是在混凝土领域实现可持续发展的重要途径之一。在旧路升级改造过程中,如何寻求性价比高的技术手段,以达到抑制或延缓反射裂缝出现的目的,一直以来
环介导等温扩增技术是一种新兴的核酸检测方法,利用4个特异性引物在等温条件下对目的DNA进行扩增。本研究设计了3套LAMP引物,建立了同时检测哈氏弧菌、鳗弧菌和溶藻胶弧菌的多