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恶性肿瘤是危害人类生活的主要疾病之一，传统的治疗手段和药物对某些恶性肿瘤的治疗效果并不理想，寻找新的高效抗肿瘤药物成为当务之急。多金属氧酸盐高效、低毒的抗肿瘤活性已有报道，硼钨酸嘧啶盐（PBT）系硼钨酸盐与嘧啶经一定的化学合成而成的一类新的化合物，淡黄色，易溶于水。本文从其体内、外实验检测其抗肿瘤活性，初步探讨其抗肿瘤作用机制。1.1 体外MTT法检测PBT对SMMC-7721、SGC-7901、HeLa三种人癌细胞的抗肿瘤活性。IC50分别为57μg/ml、209μg/ml、193μg/ml。显示出较好的抗肿瘤活性，对恶性度较高的人肝癌SMMC-7721细胞效果尤为显著。1.2 MTT法检测PBT对FL人羊膜细胞的毒性作用，PBT在800～1600μg/ml时细胞抑制率在20%以上，最高抑制率为32.29%。表明PBT对人FL细胞有毒性作用。1.3 3H-TdR掺入法检测PBT对人肝癌SMMC-7721细胞DNA 合成的抑制作用，结果表明，随着浓度升高对DNA合成的抑制作用越强。1.4.1 流式细胞术法检测PBT对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡诱导作用，10μg/ml、50μg/ml PBT作用于SMMC-7721细胞12小时，测得凋亡率分别为12.39%、10.68%，明显高于对照组；作用24小时，测得凋亡率分别为12.93%、11.04%，明显高于对照组，100μg/ml PBT未表现出诱导细胞凋亡作用。表明一定浓度PBT有诱导肿瘤细胞凋亡作用。对细胞周期的分析表明，两个时间段细胞经 10μg/ml、50μg/ml浓度 PBT处理后G0/G1期细胞百分率明显高于对照组，S期细胞百分率明显低于对照组，100μg/ml浓度组未表现出细胞周期阻滞作用。表明一定浓度PBT可使肿瘤生长受阻于G0/G1期。 <WP=50>1.4.2 PI荧光染色观察细胞核形态变化，表现为细胞核呈现红色荧光，经PBT处理的细胞呈现典型的凋亡形态学改变，细胞核边缘不规则，可见核碎裂现象，核仁减少或消失，有凋亡小体。2.1 经口急性毒性实验，计算PBT的半数致死剂量（LD50），LD50为1117.38mg/kg，95%可信限为911.59-1369.6 mg/kg。属于低毒化合物。 2.2 建立小鼠H22实体瘤模型。PBT 25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg三个剂量对小鼠H22荷瘤的平均抑制率分别为20.32%、33.15%、52.94%，高剂量组抑瘤率与5-Fu组比较无显著性差异（P>0.05），表明PBT有较好的抗肿瘤活性，且高剂量作用效果可与临床阳性药物5-Fu相媲美。2.3 荷瘤小鼠尾静脉采血，计数白细胞数。结果表明PBT低剂量组白细胞数升高，中、高剂量组白细胞数未见降低，而5-Fu组白细胞数降为对照组细胞数的一半（P<0.05）。表明治疗剂量PBT无降外周血白细胞数的毒性作用，且低剂量PBT有升白细胞作用。2.4 荷瘤小鼠称重处死，无菌取出脾脏与胸腺并称重，计算脏器指数，结果显示，5-Fu组脾指数及胸腺指数均低于对照组（P<0.05），PBT各剂量组脾指数均高于5-Fu组（P<0.05），低、中剂量组脾指数均高于对照组（P<0.05）；低剂量组胸腺指数高于对照组（P<0.05），低、中剂量组胸腺指数均高于5-Fu组（P<0.05）。表明治疗范围内PBT对荷瘤小鼠脾与胸腺无明显影响，一定剂量PBT能促进脾与胸腺重量的增加。2.5 用脾细胞对有丝分裂原ConA的反应性来检测小鼠脾脏T淋巴细胞增殖反应。结果显示，低、中剂量PBT具有提高淋巴细胞转化功能的作用（P<0.05）。2.6 由FCM流式细胞术检测PBT对荷瘤小鼠脾与胸腺细胞凋亡率的影响。结果显示，低剂量PBT能抑制小鼠脾细胞凋亡。三个剂量PBT均能抑制小鼠胸腺细胞凋亡，从而保护大量胸腺细胞免于死亡，调节其免<WP=51>疫防护功能。本实验结果表明，PBT在体内、外均有较好的抗肿瘤活性，且属于低毒化合物，作用机制可能为：通过影响核酸代谢来抑制肿瘤细胞DNA合成；使肿瘤细胞周期阻滞于G0/G1期；诱导肿瘤细胞凋亡等，来抑制肿瘤细胞生长，达到抗肿瘤效果；刺激免疫细胞的活性，保护免疫器官，增进机体免疫功能，从而间接起到辅助抗肿瘤作用。其深入的作用机制有待进一步研究，能否开发成为新的抗肿瘤药物尚需完成大量工作。