健脾化瘀方联合化疗药物对结肠癌LoVo细胞生长的影响及相关机制研究

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研究目的:  探讨健脾化瘀方联合5-FU、L-OHP对人结肠癌细胞株LoVo增殖的影响,两者相互作用的可能机制,进一步探索中药与化疗药物联合抗肿瘤的作用,为肿瘤的综合治疗提供新的思路。  研究方法:  1采用MTT法测定健脾化瘀方、5-Fu、L-OHP单药及联合作用于指数增殖期LoVo细胞的效应;应用中效原理进行统计分析,绘制单药及联合用药对肿瘤细胞生长的影响曲线确定联合用药时的效应(Fa)-合用指数(CI)的关系,判定药物间的相互作用;  2集落形成实验检测健脾化瘀方联合5-Fu、L-OHP对集落形成的影响;  3用流式细胞仪检测健脾化瘀方联合5-Fu、L-OHP对LoVo细胞凋亡的影响;  4采用RT-qPCR方法检测健脾化瘀方对5-Fu疗效相关基因TS、OPRT mRNA表达的影响, L-OHP疗效相关基因ERCC1、BRCA1 mRNA表达的影响,推断健脾化瘀方与5-Fu、L-OHP间相互作用的分子机制。  研究结果:  1随着药物浓度增加,对LoVo细胞生长的抑制效应也增加,联合用药抑制效果更明显;在相应的浓度区间,健脾化瘀方与两种化疗药物存在着协同作用(CI<1)。  25-FU、L-OHP、健脾化瘀方单药能抑制集落形成;联合用药后克隆抑制率有所增加。  35-FU、L-OHP、健脾化瘀方单药组24h凋亡率是22.57%、16.43%、14.83%;联合用药后凋亡率显著增加。  4健脾化瘀方联合5-FU、L-OHP作用于LoVo细胞后,疗效相关基因TS、ERCC1、BRCA1mRNA表达均下调。  研究结论:  健脾化瘀方单药及联合5-FU、L-OHP可抑制人结肠癌细胞株LoVo的增殖及集落形成,能够诱导其凋亡;两者之间的作用机制可能与下调TS、ERCC1、BRCA1的表达有关。
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