乙酰胆碱(Ach)作为脑、视网膜和副交感神经系统的神经递质已证实在细胞的发生和发展过程中参与细胞代谢、分化和基因表达。乙酰胆碱受体分为毒蕈碱型胆碱能受体(M受体)和烟碱型胆碱能受体(N受体)。M受体是一类与G蛋白结合的受体家族，生物学研究将其分为m1～m5五个亚型，它广泛分布于眼组织中，参与视网膜的信号传导，角膜和晶状体的修复，在胚胎及生后的眼球发育中扮演重要角色。M受体及其拮抗剂与近视的发生、发展也密切相关。已发现非选择性M受体拮抗剂阿托品，选择性M1受体拮抗剂哌仑西平，能够有效地抑制人和多种动物实验性近视的发展，但是其作用机制至今尚不明确。有研究证实，阿托品是通过非调节途径抑制实验性近视。也有学者认为，玻璃体腔注射神经毒素破坏胆碱能无长突细胞，M受体拮抗剂抑制FDM的发展没有受到影响，提示视网膜外的M受体可能参与调控眼球的生长。M受体拮抗剂抑制近视所需的药物剂量高于相对理论值，提示M受体拮抗剂抑制近视的发展可能是通过非胆碱能通路。那么， M受体五种亚型在实验性近视发生过程中表达是否发生变化?哪些M受体亚型参与调控眼球的生长?M受体拮抗剂是以何种途径抑制近视发展呢?这些问题有待进一步深入研究。 本课题从分子生物水平、器官及组织形态学入手，通过研究正常视觉和形觉剥夺近视条件下豚鼠眼视网膜、脉络膜、巩膜和虹膜一睫状体组织中M型受体的表达变化，探讨M受体是否参与调控眼球的生长，以及M受体拮抗剂抑制近视发展的作用位点和可能的作用机制。 第一章.正常幼龄豚鼠眼组织中M受体五种亚型的分布。 目的： 探讨M受体五种亚型在正常幼龄豚鼠眼视网膜、脉络膜、巩膜和虹膜一睫状体组织中分布及其mRNA和蛋白水平的表达。 方法： 2周龄的三色豚鼠6只。冰冻切片，免疫荧光观察M受体五种亚型在正常豚鼠眼组织的分布。提取正常豚鼠视网膜、脉络膜、巩膜和虹膜一睫状体组织总RNA和蛋白质，RT-PCR和Western blowing分别检测M受体五种亚型mRNA和蛋白水平的表达。 结论：M受体五种亚型广泛分布于豚鼠眼视网膜、脉络膜、巩膜和虹膜一睫状体组织中。 第二章.豚鼠形觉剥夺性近视眼组织中M受体五种亚型表达的变化表达的变化。 目的： 探讨豚鼠形觉剥夺性近视眼视网膜、脉络膜、巩膜和虹膜一睫状体组织中， M受体五种亚型的表达变化。 方法： 1～2周龄的三色豚鼠36只，随机分为形觉剥夺性近视眼组(FDM)(n=21只)和正常组(N)(n=15只)。FDM组豚鼠随机给予一眼戴磨砂镜片，另一眼开放作为自身对照组(FC)(n=21只)。21天后测量三组动物眼屈光度和眼轴长度。石蜡切片，H.E.染色观察眼组织形态学改变。提取各组眼视网膜、脉络膜、巩膜和虹膜一睫状体组织总RNA和蛋白质，半定量RT-PCR和Westernblowing检测M受体五种亚型的表达变化。所有数据用均数士标准差(Mean±SEM)表示，SPSS 11.0统计软件包进行处理，多组问的比较采用单因素方差分析和Tukey post hoc检验，p<0.05作为差异有显著性标准。 结论：配戴磨砂镜片的方法可在21天内诱导三色豚鼠实验近视，成功建立形觉剥夺性近视动物模型。在豚鼠FDM的形成中，后极部巩膜组织的M1和M4受体的表达显著性增加，提示在近视眼发生和发展中，巩膜组织的M受体可能参与调控眼球的生长。 第三章.M受体拮抗剂抑制豚鼠形觉剥夺性近视作用机制的研究。 目的： 通过玻璃体腔注射非选择性M受体拮抗剂阿托品和选择性M1受体拮抗剂哌仑西平，研究其对豚鼠形觉剥夺性近视眼视网膜、脉络膜、巩膜和虹膜一睫状体组织中M受体表达的影响。 方法： 1～2周龄的三色豚鼠84只，随机分为五组：正常对照组(N)12只，单纯形觉剥夺组(FDM)18只，药物对照组(S)18只，哌仑西平组(P)18只，阿托品组(A)18只。均以左眼为实验眼，P组隔日玻璃体腔注射500μgpirenzepine；A组隔日玻璃体腔注射100μg atropine；S组隔日玻璃体腔注射PBS。21天后结束实验。 H.E.染色观察眼组织形态学改变。提取各组眼视网膜、脉络膜、巩膜和虹膜一睫状体组织总RNA和蛋白质，半定量RT-PCR和Westernblotting检测M受体五种亚型的表达变化。统计学检验同第二章。 结论：M受体拮抗剂能够有效抑制豚鼠形觉剥夺近视的发展。巩膜组织M1和M4亚型及其胆碱能通路可能参与M受体拮抗剂抑制近视发展。