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目的:精神分裂症是一种常见的精神类疾病,严重影响患者生活。其症状包括阳性症状、阴性症状以及认知障碍。氯氮平是非典型抗精神病药的代表,对精神分裂症的阴、阳性症状均有较好治疗效果,能够作用于包括5-HT受体在内的多种受体。5-HT2B受体属于G蛋白偶联受体,有研究表明5-HT2B受体的功能丧失能够赋予小鼠精神分裂症样行为和神经药理学表型,这一研究结果表明5-HT2B受体与精神分裂症具有相关性。星形胶质细胞能够表达5-HT2B受体,并且氯氮平对其具有高度亲和力。G蛋白偶联受体能够激活上皮生长因子受体,继而诱导细胞外信号调节激酶发生活化,而ERK1/2的激活能够引起不同效应器的改变,如离子通道、基因表达、细胞骨架蛋白功能等。瞬时受体电位通道（TRPC）包括7个亚型,星形胶质细胞主要表达TRPC1,TRPC1的缺失、过表达与活化均能够对胞质Ca2+水平产生影响。虽然现阶段没有直接证据表明TRPC在精神分裂症中的作用,但其涉及神经元发育和基本突触机制提示其在精神分裂症中的潜在作用。氯氮平除了能够治疗精神分裂症之外,还能够对情感障碍起到治疗作用,某些抗情感障碍药物的使用也能够对精神分裂症的治疗起到作用。抗情感障碍药物能够对星形胶质细胞TRPC1表达产生影响,推测氯氮平也能够影响星形胶质细胞TRPC1表达。本实验将对氯氮平下调TRPC1 mRNA表达的作用机制进行探究。1、确定氯氮平对ERK1/2磷酸化水平的影响,并对信号传导通路进行探究。2、确定氯氮平对TRPC1 mRNA表达的影响,并对其作用机制进行探究。3、确定氯氮平对星形胶质细胞胞内Ca2+浓度的影响。方法:本实验中取新生小鼠大脑皮质进行星形胶质细胞原代培养,以氯氮平及抑制剂对细胞进行处理。实验以蛋白免疫印迹检测星形胶质细胞ERK1/2磷酸化水平,以逆转录聚合酶链反应和琼脂糖凝胶电泳检测TRPC1 mRNA表达,以荧光探针技术对星形胶质细胞Ca2+再充功能进行检测。实验以不同浓度氯氮平对星形胶质细胞作用不同时间,观察其时间依赖性与浓度依赖性。以MEK1/2/ERK1/2通路抑制剂U0126鉴别氯氮平引起TRPC1 mRNA表达变化是否依赖于ERK1/2磷酸化的信号传导通路,以5-HT2B受体抑制剂SB204741和EGFR抑制剂AG1478鉴别氯氮平是否通过5-HT2B受体引起EGFR激活,继而引起ERK1/2磷酸化。实验所得数据以SPSS 12.0软件进行统计分析,并以one-way ANOVA方法对多组资料进行比较,P<0.05表示差异有统计学意义。结果:1、浓度依赖性检测结果中,氯氮平浓度为100 nM时星形胶质细胞ERK1/2磷酸化程度的上升最为显著,差异有统计学意义（P<0.05）。时间依赖性检测结果中,100 nM氯氮平对作用时间为20 min时,ERK1/2磷酸化程度增加最为明显,差异有统计学意义（P<0.05）。5-HT2B受体抑制剂SB204741、EGFR酪氨酸激酶抑制剂AG1478、MAPK/ERK1/2通路抑制剂U0126均能够显著抑制氯氮平引起的磷酸化程度增加,差异有统计学意义（P<0.05）。2、氯氮平能够下调星形胶质细胞TRPC1 mRNA表达。抑制剂SB204741、AG1478、U0126均能够显著抑制氯氮平引起的TRPC1 mRNA表达下调,差异有统计学意义（P<0.05）。3、氯氮平能够下调星形胶质细胞胞内Ca2+再充,抑制剂SB204741、AG1478、U0126均能够显著抑制氯氮平引起的星形胶质细胞胞内Ca2+再充功能下调,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:氯氮平引起星形胶质细胞ERK1/2磷酸化水平提高具有浓度依赖性和时间依赖性。氯氮平能够通过5-HT2B受体介导EGFR激活,继而引起星形胶质细胞ERK1/2磷酸化水平提高。星形胶质细胞ERK1/2磷酸化水平的提高能够进一步引起TRPC1 mRNA表达下调以及胞内Ca2+再充功能。