不同结构形貌组分的金磁纳米颗粒对巨噬细胞活性和功能影响的初步探究

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磁性纳米颗粒是纳米材料发展的一个重要分支,除了具有普通纳米材料在粒径上的优势外,还具有特殊的磁学性质(超顺磁性),这些性质使磁性纳米材料在生物医学领域得到了广泛的应用,如活体磁共振成像、生物标志物检测、靶向药物递送、细胞分离和酶的固定化等。金磁纳米粒子是由Fe3O4组分与金组分形成的复合纳米材料,金组分保证了复合材料的等离子体共振吸收、高效偶联生物分子以及良好的生物相容性等性质,而氧化铁纳米粒子又保证其在外磁场存在情况下的可分离特性。鉴于金磁纳米粒子的优良性质,其在生物医学领域应用更加广泛,已成为近几年的研究热点。巨噬细胞源自单核细胞,属免疫细胞,在脊椎动物体内参与非特异性防卫(先天性免疫)和特异性防卫(细胞免疫)。已有研究报道,当纳米粒子进入体内后,大部分被巨噬细胞吞噬,影响纳米粒子在体内发挥相应的功效。本课题选用小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7作为研究对象,以不同形貌结构的磁性纳米粒子对巨噬细胞活性和功能的影响开展系统研究。选用三种不同的磁性纳米颗粒:两种金磁纳米颗粒(花瓣金磁和核壳金磁),一种磁性纳米颗粒(Fe3O4),通过纳米粒子对小鼠巨噬细胞(RAW 264.7)的细胞毒性以及生物效应影响开展研究,主要包括细胞毒性、细胞吞噬、免疫反应、以及磁性纳米粒子对蛋白质的吸附等。实验结果表明核壳金磁与四氧化三铁纳米颗粒在实验浓度范围内对于RAW 264.7没有明显毒性,而花瓣金磁在浓度大于100μg/m L时,表现出浓度依赖性的细胞毒性。然而三种磁性纳米粒子处理对于RAW 264.7 Caspase-3的表达没有产生明显的影响,提示RAW 264.7没有发生细胞凋亡。活性氧(ROS)的检测结果表明花瓣金磁刺激RAW 264.7细胞产生的ROS最多,核壳金磁次之,四氧化三铁纳米颗粒产生的最少。RAW 264.7细胞的脂质过氧化检测显示三种磁性纳米粒子并未诱导RAW 264.7细胞膜产生明显的脂质过氧化情况。巨噬细胞对三种纳米颗粒的吸附情况表明:花瓣金磁吸附量最少,而核壳金磁与Fe3O4磁性纳米颗粒吸附量较多。从对磁性纳米微粒处理后巨噬细胞极化的研究结果可以看出:核壳金磁诱导RAW 264.7细胞向M1型巨噬细胞分化,而花瓣金磁以及四氧化三铁磁性纳米粒子对巨噬细胞的极化未产生明显的诱导作用。最后对三种不同磁性纳米颗粒表面吸附的血清蛋白进行了初步的检测,结果发现核壳金磁与四氧化三铁磁性纳米粒子表面吸附的蛋白质种类和含量相似,与花瓣金磁表面吸附的蛋白质具有明显的差异。
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