重组杆状病毒在气升式反应器中感染悬浮昆虫细胞HzAM1的感染策略优化

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在重组蛋白和生物杀虫剂的工业化生产中,如何提高其产量越来越受到重视。利用昆虫细胞-杆状病毒表达体系来实现其工业化生产也越来越受到关注。在以往的研究中,主要通过几个方面去优化昆虫细胞-杆状病毒表达系统:细胞株;培养基;溶氧;生物反应器和感染策略(感染策略包括感染复数(MOI)、感染时间(TOI)、细胞初始浓度、培养基的替换等)。利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统来实现重组蛋白和生物杀虫剂的大规模生产,不仅需要提高杆状病毒在昆虫细胞中的表达;而且还需要大量的细胞。要想得到大量的细胞,必须要在生物反应器中进行培养,而提高病毒的产量必须优化其感染策略。本研究利用正交设计实验在气升式反应器中对感染复数、感染时间、细胞初始浓度和溶氧值4个因素进行分析研究,得到其对非包含体病毒(BV)和包含体病毒(OV)产量的影响,并优化得到最佳感染条件。结果表明在气升式反应器中杆状病毒感染悬浮昆虫细胞的最佳感染条件为初始细胞浓度为2.0×105cells/ml,在细胞处于对数生长期初期接种感染复数为0.1的病毒感染细胞,设定体系的溶氧值为10%时,得到的最大BV滴度为2.51×107TCID50/ml,最大的OV浓度为2.85×106OVs/ml。
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