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膏方是冬令进补佳品,但只是数千年临床实践经验的总结,并未有详实的科学评价。本文以经典膏方琼玉膏为例,对其进行系统研究,为其传承和创新应用提供技术支撑。琼玉膏由生地黄、茯苓、人参3味中药组成,首次记载于宋·洪遵的《洪氏集验方》,具补虚健脾,滋阴润燥功效。本文在前期琼玉膏化学成分表征的基础上,对其进行了原料药材质控,传统工艺科学内涵,制备工艺优化,糖类组分表征,质控方法及对肠菌调节作用等研究,具体如下:一、文献研究对琼玉膏的制备工艺、物质基础、药理药效、临床应用等文献进行综述,同时指出了现有研究存在的不足,提出今后研究的方向。二、琼玉膏原料药材质量检测按《中国药典》标准要求对药材质量进行检测,保证原料质量。三、基于多组分评价的传统煎熬工艺对琼玉膏品质一致性的影响为了研究传统煎、熬工艺对琼玉膏品质的影响,探讨琼玉膏主成分在煎煮和熬制过程中的降解、转化机制,阐明其传统制备工艺的科学内涵,采用HPLC-TQ-MS法,以不同煎、熬时间5-羟甲基糠醛（5-HMF）、梓醇（catalpol）、密力特苷（melittoside）、毛蕊花糖苷（acetoside）、人参皂苷 Re（ginsenoside Re）、人参皂苷 Rb1（ginsenoside Rb1）、人参皂苷 20（S）-Rg3[ginsenoside20（S）-Rg3]、人参皂苷 Rg1（ginsenoside Rg1）、人参皂苷 Ro（ginsenoside Ro）和茯苓酸（pachymic acid）含量及重复制备样品质量分数标准差（SD）的累加值作为评价指标,发现,随着煎、熬时间的延长,上述10种活性成分的总量和部分成分的相对质量分数显著改变,总含量在煎煮1h和5 h各有一个峰值,同时重复制备样品质量分数标准差（SD）的累加值随煎煮时间延长呈下降趋势,随熬制时间延长呈先下降后增加趋势。因此,煎煮和熬制不同时间可显著影响琼玉膏活性成分的转化程度,进而影响其品质的一致性。四、基于多组分评价的琼玉膏制备工艺优化基于上述不同煎煮时间对成分含量影响的研究,采用HPLC-TQ-MS法,对琼玉膏提取、浓缩工艺进行优化,以5-HMF、梓醇、密力特苷、毛蕊花糖苷、人参皂苷Re、Rg1、Ro、Rb1、20（5）-Rg3、茯苓酸等小分子成分、多糖含量和出膏率为指标,以影响提取工艺的关键因素即加水量、提取时间、提取次数进行三因素三水平正交设计,考察长时间（A）和短时间（B）提取工艺,最终确定琼玉膏最优提取工艺为:加10倍量水,提取3次,每次1h。接着又考察不同减压浓缩温度下指标成分含量变化,确定水提液浓缩工艺为:70-80℃（真空度0.08-0.09 Mpa）减压浓缩至热测相对密度为1.20-1.30kg·L-1的清膏,较为适宜。五、琼玉膏糖类组分表征为了对琼玉膏进行整体品质评价,对其糖类组分进行了表征。首先将琼玉膏中单糖、寡糖与多糖进行分离。再采用HPLC-ELSD结合PMP衍生化/HPLC-UV法分析和测定单糖和寡糖,并进行方法学验证。分析琼玉膏中的单糖成分有木糖、果糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其平均含量为0.54%,3.93%,0.06%,0.92%和2.13%;寡糖成分有蔗糖、麦芽糖、蜜二糖、棉籽糖、甘露三糖、水苏糖,其平均含量为 4.68%,0.32%,0.67%,4.28%,2.66%,25.25%。最后采用 HPGPC法表征琼玉膏多糖分子量范围在3.5×105-2.1×106Da之间,并建立和验证了 PMP衍生化/HPLC-UV法测定琼玉膏多糖是由甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和岩藻糖按摩尔比为2:5:66:43:6:15组成。六、基于代表性成分评价的琼玉膏质控方法研究依据“深入研究,浅出标准”的原则,建立有效、可操作的质量控制方法,包括琼玉膏中生地黄和人参的薄层鉴别方法;采用HPLC-PDA法测定琼玉膏中毛蕊花糖苷含量;采用HPLC-ELSD法测定人参皂苷Rb1含量;采用苯酚硫酸法测定总多糖的含量。均进行了方法学验证。七、琼玉膏对肠道菌调节作用研究从肠道菌调节角度阐明琼玉膏的药理药效机制,将60只小鼠分为5组,分别是空白组（B）、低聚果糖组（OF）和琼玉膏低（L）、中（M）、高（H）三个剂量组。利用体外选择性培养方法检测给药前后小鼠粪便中双歧杆菌（Bifidobacterium spp.）、乳杆菌（Lactobacillus spp.）、肠杆菌（Enterobacter spp.）、肠球菌（Enterococcus spp.）和产气荚膜梭菌（Clostridium spp.）的数量,阐明琼玉膏对小鼠肠道菌群结构的影响。发现琼玉膏可扶植肠道有益菌如Bifidobacterium spp.的生长,在一定程度上使Lactobacillus spp.等有益菌数量增加,同时还能抑制Enterobacter spp.、Enterococcus spp.和Clostridium spp.等条件致病菌及肠道有害菌的繁殖。结果表明,琼玉膏改善肠道菌群结构效果较低聚果糖更加显著。