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目的:(1)观察与比较辨证论治(包括阶段论治)和辨病论治(一病一方)对肿瘤直接的抑制作用、对机体生存质量影响;以及其可能的作用机制异同。(2)进一步丰富和完善小鼠四诊采集内容和采集的标准化,优化小鼠四诊工作站。
方法:(1)依据中医四诊有关理论与实践,采用H22荷瘤雄性昆明小鼠,分别观察辨证论治(设正常组、模型组、西药组、非辨证组、辨证组,其中辨证组分瘀毒证、气虚证、阴虚证、气阴两虚证、阴阳两虚证给药)和阶段论治(设正常组、模型组、西药组、非阶段组、阶段组,其中阶段组分早期、中期、中晚期、晚期给药)对荷瘤小鼠的作用,以西药喃氟啶和中药固定处方作为阳性药物对照,同步观察:1)肿瘤抑制率、有关癌基因和肿瘤病理;2)与虚证密切相关的神经内分泌免疫网络的有关组织重量、病理和有关基因表达;3)肿瘤防治过程中荷瘤小鼠四诊和证候的演变,以及不同治疗方法的干预作用。(2)进一步丰富和完善小鼠四诊采集内容和采集的标准化工作,以及有关四诊的基础研究工作。
结果:(1)辨证论治对荷瘤小鼠的作用:1)西药组肿瘤及肿瘤组织N-ras表达抑制作用最强,中药辨证论治组肿瘤抑制等作用接近西药,且优于非辨证论治组。辨证论治对肿瘤TNF基因表达抑制作用最显著。2)西药组和模型组去瘤体重小,虚证明显,晚期,西药组更显著,副作用十分明显;中药辨证治疗改善虚证更好。3)荷瘤小鼠心率、腋温离散度大,提示存在显著的证候差异和辨证论治的重要性。部分荷瘤小鼠和非辨证组腋温降低,提示偏于阳虚。西药组腋温略升高,提示偏于阴虚火旺。而辨证论治可以有效地纠正这样的偏差。4)小鼠爪可以灵敏地反映证候的变化,一些小鼠还出现了典型的爪在不同时期的证型的演变。模型组爪色淡,与腋温下降一致,提示该模型组整体上偏于阳虚。而西药组晚期爪r偏高,也与腋温略升高一致,有阴虚倾向。辨证论治有改善作用。5)一些小鼠尾出现了典型的尾在不同时期的证型的演变。西药组晚期尾r偏高,颜色偏红,与爪的现象一致。辨证论治可以纠正证候与病机偏差。6)中期荷瘤小鼠脾脏重量及其指数明显大于正常组,晚期伴随着气血阴阳的衰弱,重量下降。西药组脾脏重量最大,晚期西药减轻最显著,提示免疫功能开始受到显著的抑制。辨证论治总体评价最好。中、晚期模型组肾上腺重量逐渐下降。各用药组中,西药组最小,非辨证组次之,辨证组最大。辨证论治还可以保持GnRH基因表达接近正常状态,而模型小鼠、西药和中药非辨证论治组均下降。表明辨证论治能有效地保护代表人体正气的内分泌免疫系统。(2)阶段论治对荷瘤小鼠的作用:1)在肿瘤抑制方面,西药作用肯定。中药组中期有一定作用,晚期没有作用。中药组中,阶段论治较非阶段论治要好。不同治法对N-ras基因表达调控作用出现一致性变化。2)阶段论治对去瘤体重改善优于非阶段论治和西药。提示不加阶段论治的中药治疗,对带瘤生存质量的改善作用不明显,甚至不利。3)晚期西药组肾上腺重量小;在垂体方面,非阶段和西药组LH表达数量也最低。4)不同批次之间小鼠体质的差异,反映在肿瘤重量、去瘤体重、脾脏重量、腋温、爪尾r值等多方面。提示小鼠体质存在差异,总体上存在气虚、阳虚和兼有痰湿。体质的差异,导致了前后疗效的不一致,这也提示辨证论治的重要性。(3)首次制作出正常小鼠爪、尾横断面的组织学切片,为检测持爪、尾的方法提供了初步的依据。首次实现小鼠自主活动的录象与时候计算机播放统计。
结论:(1)西药抑制肿瘤作用优于中药,但对小鼠体质和神经内分泌免疫网络损伤显著。(2)总体上,中药辨证论治对肿瘤抑制、对小鼠体质和神经内分泌免疫网络的保护优于阶段论治、更优于非辨证论治和非阶段论治中药。(3)荷瘤小鼠存在显著的个体差异,阶段差异,要求辨证论治。(4)荷瘤小鼠是可以实现四诊客观化和辨证论治的。