一株纤维菌对人参茎叶皂甙的生物转化研究

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人参是我国名贵中草药,其主要的活性成分是人参皂苷。目前,已经从人参中分离出的人参单体皂苷有40多种。其中,一些稀有人参皂苷,如Rg3、Rg2、CK、Rh2等,具有重要的生物活性。但这些稀有皂苷在天然人参中的含量较少,甚至根本不存在。它们的制备是目前研究人参的热点之一。本文使用选择性培养基从土壤中分离出20余种人参皂苷转化菌株。其中,从人参种植土壤中分离出一株细菌(编号21),能转化人参皂苷,产生具有较高活性的稀有皂苷。通过16SrDNA测序,确定该细菌为纤维属细菌属细菌(Cellulosimicrobiumsp.Strain 21)。该细菌可转化原人参二醇型皂苷Rb1、Rb2和Rc,转化产物有三种。其中,主要产物为稀有人参皂苷Rg3,另外两种产物分别为人参皂苷C-Y和MC。Cellulosimicrobium sp.Strain 21对人参皂苷Rb1、Rb2 和 Rc 转化路径分别为:Rb1 → Rd → Rg3;Rb2 → Rg3/C-Y;Rc → Rg3/Mc。人参皂苷Rg3具有显著的抗肿瘤活性,使用该细菌转化人参皂苷制备稀有皂苷Rg3具有重要的应用价值。在人参茎叶中,人参皂苷Rd含量较高,并且该菌对Rd的转化效率相对较高,因此本文优化了纤维属细菌转化人参皂苷Rd产生Rg3的条件。得到的优化结果为:最佳底物浓度,1.5 mg/mL;转化最适pH值,7.0-8.0;转化最适温度,31-37℃;转化时间,8h。此外,对该细菌转化原人参三醇型皂苷的能力进行了研究。Cellulosimicrobium sp.Strain 21能转化人参三醇型阜苷 Re 和 Rh1,转化路径如下:Re → Rg2;Rh1→protopanaxatriol。本研究有望为人参皂苷Rg3和Rg2的工业化生产提供可行的方法,并为细菌转化人参皂苷的研究提供理论依据。
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