Marshall和Warren于1983年首次分离得到了幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，简称H.pylori或HP)，该菌是一种螺旋状、微需氧、主要定植于人胃粘膜的革兰阴性菌。随着研究的深入，越来越多的研究证据表明HP感染与慢性活动性胃炎、消化性溃疡、胃癌及粘膜相关淋巴组织(mucosa-associated lymphoid tissue，MALT)淋巴瘤的发生密切相关，1994年WHO将其列为一级致癌因子。HP感染人群广泛，在我国普通人群中感染率达50％～60％，准确诊断HP感染是医学界面临的一个亟待解决的问题。检测HP感染的方法可分为侵入性和非侵入性两类。侵入性方法指依赖胃镜的检查方法，这些方法均需在胃镜检查时取胃黏膜进行检测，常用的有细菌培养、组织病理学检查和快速尿素酶试验，其中HP培养为诊断感染的金标准之一，但随着临床治疗的增加,培养难度加大，同时需要一定的经验和条件，目前多用于科研领域。对于侵入性检测方法，许多患者难以接受，尤其是儿童、老人和孕妇。在非侵入性方法中，血清抗HP IgG抗体检测为成熟的检测技术，对未接受过正规抗幽门螺杆菌治疗者的初次诊断效果较好，但不能及时反映幽门螺杆菌的根除效果，根治后血清中的HP抗体滴度水平可维持在阳性限以上超过半年。作为另一个金标准的13C尿素呼气试验特异性和敏感性均在95％以上，但分析仪器昂贵、收费较高；幽门螺杆菌粪抗原检测具有较高的特异性和敏感性，且使用方便、廉价，省时，但在根除效果测定时易出假阴性结果，目前用HpSA评价HP的根除效果还存在争议[1]。Soichiro等[2]发现Hp感染者血、尿中均存在HP抗体，两者具有较高的一致性，因此，测定尿HP抗体更为简捷方便，但HP抗体阳性不能证明有HP的现症感染，HP抗体阴性也不能排除HP感染的存在，其临床意义有限，多用于流行病学调查。与检测循环抗体相比，抗原的检出直接反映了病原生物现症感染的信息。目前，已有多种病原生物相关的抗原成分能够从相应的患者尿液中检测出来，这些病原生物涉及到寄生虫、细菌以及病毒。一些抗原成分已经作为诊断依据应用于临床中，如嗜肺军团菌LP抗原，一些抗原成分如结核菌抗原、巨细胞病毒以及血吸虫抗原等检测的实验研究中也取得进展，具有开发成为诊断方法的潜在价值。研究表明，HP定居在胃粘膜上，机体可以通过被动吸收可溶性细菌产物，胃粘膜上皮细胞直接吞饮细菌抗原，经受损的紧密连接转运抗原和肠粘膜上皮吸收细菌抗原而使HP抗原成分入血，但迅速被单核一巨噬细胞系统清除[3]。目前已有自血清中检测出可溶性HP抗原的相关方法[4]的报道，但HP感染者尿液中是否有与之相关的抗原成分至今未见有文献报道，若能够从尿液中找到与HP感染相关的抗原成分并建立检测方法，则对HP感染的诊断具有重要意义，同时也可以为HP与宿主相互作用的机理及致病机理的研究方面提供重要的线索。随着检测和鉴定技术的发展，高通量、高灵敏度、高自动化的仪器不断推出，大大促进了蛋白质组学的发展，现在，尿液蛋白质组学分析在疾病的诊断、病程的监测和药物靶点的开发中都具有重要的实际意义。本研究拟通过蛋白质组学的技术方法从幽门螺杆菌感染者尿液中寻找到并筛选出可能存在的具有诊断价值的可溶性抗原，找出其在感染人群中的分布规律并最终确定其是否具有诊断价值。本研究采用SPE方法和TCA-DOC沉淀法制备尿蛋白，并对获得的尿蛋白样品使用Bradford法和BCA法测定蛋白含量及SDS-PAGE电泳分析，对尿蛋白制备方法进行了评价，并使用nanoLC-MS/MS对TCA-DOC沉淀法制备的尿蛋白进行蛋白质组学分析，通过数据库检索鉴定出尿液样品中存在的蛋白或多肽成分，在鉴定出来的蛋白中大部分为人体蛋白成分，有少量为细菌成分。本研究通过探索初步建立了微量蛋白质组学分析的方法，该方法能够快速、高通量和高灵敏度获得尿液蛋白成分信息，有可能适用于检测其他体液及生物样品中的蛋白成分，对不明原因的病原生物感染快速诊断鉴别以及疾病的监测等具有潜在的应用价值。