【摘 要】
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南瓜为葫芦科南瓜属的一年生蔓生草本植物,是我国重要的瓜类作物。随着人们饮食结构的改善和对南瓜营养成分及其保健价值的深入研究,南瓜的种植面积逐年扩大,但常年种植南瓜的地区极易发生白粉病,南瓜的产量和品质受到严重的影响。南瓜白粉病病原菌的种类繁多,对环境适宜性强,而南瓜抗白粉病种质资源稀少,一直以来,南瓜白粉病研究进展缓慢。本研究通过对湖南省长沙地区自然发病的南瓜白粉病病原菌的种类进行鉴定,确定其生理
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南瓜为葫芦科南瓜属的一年生蔓生草本植物,是我国重要的瓜类作物。随着人们饮食结构的改善和对南瓜营养成分及其保健价值的深入研究,南瓜的种植面积逐年扩大,但常年种植南瓜的地区极易发生白粉病,南瓜的产量和品质受到严重的影响。南瓜白粉病病原菌的种类繁多,对环境适宜性强,而南瓜抗白粉病种质资源稀少,一直以来,南瓜白粉病研究进展缓慢。本研究通过对湖南省长沙地区自然发病的南瓜白粉病病原菌的种类进行鉴定,确定其生理小种,研究该生理小种最适宜的白粉病接种条件及其保存方式,利用该白粉病病原菌筛选抗白粉病种质资源,加快南瓜白粉病方面的研究进程,为南瓜抗病白粉病育种奠定基础。主要研究结果如下:1.采集后的白粉菌在南瓜叶片上通过活体保存的方式,纯化5次后用于白粉病病原菌的鉴定,挑取新生分生孢子放置载玻片上,3%KOH溶液着色,10x40倍的电子显微镜下,观察到白粉病孢子呈椭圆形,白粉病分生孢子内有被染色的纤维状体的存在,断定湖南省长沙地区白粉病病原菌属于单囊壳白粉菌(P.xanthii)。2.提取纯化后的白粉病病原菌的DNA,利用真菌通用的ITS引物进行PCR操作,PCR产物进行凝胶电泳,以2000bp的Marker做对照,条带处于500bp~750bp之间,将PCR产物送至擎科公司进行测序,测序结果显示PCR产物片段大小为522bp,用DNAMAN软件将PCR产物的测序结果与已报道的白粉病菌的ITS序列进行比对,制作系统发育树,结果显示湖南省长沙地区白粉病病原菌ITS序列与单囊壳白粉病菌的同源性高达99%,断定长沙地区的白粉病病原菌属于单囊壳白粉菌(P.xanthii)。3.国际通用的13种甜瓜寄主鉴别材料对不同的白粉病菌生理小种,表现出不同的生理抗性。在接种长沙地区的白粉病病原菌后,甜瓜鉴别寄主材料Iran H、Top mark、Védrantais、PMR 45、Nantais Oblong接种10d叶片出现明显白粉病斑;20d后植株叶片及茎干出现浓厚白粉层。根据甜瓜白粉病鉴别寄主对不同生理小种的抗感反应,判断湖南长沙地区白粉病病原菌属于单囊壳白粉菌(P.xanthii),生理小种为2France。4.在单因素处理的试验条件下对温度、湿度、菌液接种浓度、苗龄条件进行研究。单因素条件处理下接种条件最优的处理分别是温度为30℃、湿度为80%、孢子悬浮液浓度为2.5x10~5~5.0x10~5个·ml-1、苗龄为三叶一心。5.考虑单因素条件彼此存在互作作用,挑选温度、湿度、菌液接种浓度、苗龄进行(L9(3~4))的正交试验设计,确定温度为30℃、湿度为55%、孢子悬浮液浓度为2.5x10~5~5.0x10~5个·ml-1、苗龄为三叶一心为发病最优的处理。6.通过保存白粉病一年后,重新接种在健康植株的方法验证了张秀华等人的保存白粉病病原菌方法的有效性。7.将湖南长沙市金山基地纯化扩繁后的白粉病病原菌接种在90份南瓜材料上,南瓜种植在大棚内,在五片真叶时期采用喷施接种的方式,孢子悬浮液浓度为2.5x10~5~5.0x10~5个·ml-1,在成株期记录每一株的南瓜的感病等级,计算病情指数。筛选出高抗材料9份,抗病材料11份,中间型材料30份,感病材料20份,高感材料20份。
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