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本试验分析12个微卫星位点在德国牧羊犬、拉布拉多犬和史宾格犬三个品种的遗传多样性并探索其在亲权鉴定中的应用,旨在:1.了解警犬的遗传多样性,为引进犬的品种保存提供理论依据;2.利用多重PCR对警犬进行亲子鉴定,为进一步开发我国警犬的亲子鉴定试剂盒奠定基础,促进我国警犬DNA数据库的早日建立;3.丰富警犬DNA数据库,为建立基因标记辅助选择育种奠定基础。 本试验所用样本来自三个品种的警犬,共137个样本(德国牧羊犬54头,拉布拉多犬57头,史宾格犬26头),主要内容如下: 1.三个警犬品种微卫星位点的遗传多样性分析 选择位于犬不同染色体上的12个微卫星位点标记,即PEZ1、PEZ3、PEZ6、PEZ8、PEZ10、PEZ13、PEZ15、PEZ16、PEZ19、FH2010、FH2079和FH2611,研究在德国牧羊犬、拉布拉多犬、史宾格犬中的多态信息含量(PIC)、遗传多样性(H)、期望杂合度(H(e))、观察杂合度(H(o))和有效等位基因(ne),并分析这三个品种的遗传距离,结果表明:位点PEZ3、PEZ6、PEZ8、PEZ10、PEZ13、PFZ15、PEZ16、FH2010和FH2611具有高度多态,PEZ19在拉布拉多犬中呈中度多态,在其它两个品种中呈高度多态;FH2079在史宾格犬中呈中度多态,其它两个品种中呈高度多态;PEZ1在德国牧羊犬中属低度多态,而在其它两个品种中也呈高度多态;经遗传距离分析,德国牧羊犬与史宾格犬遗传距离较德国牧羊犬与拉不拉多犬或是拉不拉多犬与史宾格犬的遗传距离远。 2.利用多重PCR对警犬进行亲子鉴定 用软件cervus 2.0统计实验一的基因型,结果表明这12个位点在三个品种的双亲累积非父排除率达到了99.8%以上,其中拉布拉多犬和史宾格犬的累积非父排除率达到我国法医的认定标准99.95%,拉布拉多犬和史宾格犬的单亲排除率也达到99%以上,可以用于亲子鉴定。把12个微卫星基因座分成六组,运用多重PCR技术,对12个位点扩增,通过分析确定拉布拉多犬母女关系的2头犬血液样本和6头疑似父亲的血液样本的基因型,确定其亲缘