【摘 要】
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目的:检测TMEFF1在卵巢上皮性肿瘤中的表达及研究siRNA干扰TMEFF1基因对卵巢癌细胞生物学行为的影响。 研究方法:方法一:采用免疫组化SP法检测卵巢上皮性癌(80例)、卵巢上
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目的:检测TMEFF1在卵巢上皮性肿瘤中的表达及研究siRNA干扰TMEFF1基因对卵巢癌细胞生物学行为的影响。 研究方法:方法一:采用免疫组化SP法检测卵巢上皮性癌(80例)、卵巢上皮性交界性肿瘤(11例)、卵巢上皮性良性肿瘤(12例)及正常卵巢组织(15例)中TMEFF1的表达,分析其与卵巢上皮性癌的临床病理参数和预后的关系。方法二:利用siRNA技术抑制其卵巢癌细胞系CAOV3及OVCAR3中TMEFF1的表达,并通过RT-PCR、Western Blot分别从mRNA水平和蛋白水平检测TMEFF1基因的表达情况;MTT法测定细胞增殖能力;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell实验检测细胞侵袭能力;流式细胞技术检测细胞凋亡的情况。 结果:1、TMEFF1主要定位于胞浆和胞膜,在卵巢上皮性癌中的阳性表达率为(91.25%),明显高于交界性肿瘤组(45.45%)、良性肿瘤组(33.33%)及正常卵巢组(26.67%)(P均<0.05)。TMEFF1为影响卵巢上皮性癌预后的独立危险因素(P<0.05)。2、siRNA干扰TMEFF1基因的表达使卵巢癌细胞侵袭、迁移及增殖能力受到明显抑制:Transwel小室侵袭结果显示,干扰组穿过Matrigel侵袭细胞个数较阴性对照组明显减少(P<0.05)。划痕实验结果显示,干扰组细胞伤痕愈合能力较正常组、阴性对照组均明显减弱(P<0.05)。MTT实验结果显示,干扰组细胞在转染后24h、48h以及72h,呈现的细胞生长曲线较正常对照组、阴性对照组平缓,生长速度亦呈现减缓(P<0.05)。流式检测细胞凋亡结果显示:干扰组细胞较阴性对照组比较,细胞凋亡率无明显差异(P>0.05)。 结论:1、TMEFF1的表达与卵巢癌的发生、发展及预后相关。2、TMEFF1促进卵巢癌细胞的增殖、侵袭和迁移。进一步为临床上应用TMEFF1靶向免疫治疗卵巢癌提供有力的基础实验支持。
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