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研究背景与目的 死亡时间具有重要的法医学意义,传统上主要通过尸冷等尸体现象及胃内容物的消化程度等进行推断,但迄今缺乏满意的推断方法。对于死后3d以上的腐败尸体,应用尸食性蝇类的生长发育规律,可对死亡时间作较准确的推断。已有研究结果表明,蝇类幼虫表皮碳氢化合物的组成有显著的日龄特征,在幼虫日龄及死亡时间推断中有较大的应用潜力。本研究以绯颜裸金蝇(双翅目:丽蝇科)为材料开展研究,阐明其幼期表皮碳氢化合物的时序性变化规律及环境温度和土壤湿度对其的影响,为表皮碳氢化合物在其幼虫日龄及死亡时间推断中的应用提供科学依据。 材料与方法 绯颜裸金蝇以汕头市区采集的幼虫建立实验种群。取2h所产卵块于人工气候箱中以新鲜瘦猪肉饲养。气候箱湿度设为90%±5%RH,温度设24、28、32±0.5℃三个处理,土壤湿度设三个处理(30%、60%、90%±5%RH)。幼虫自适当日龄起,每12h或24h取样一次;蛹期于化蛹后第一天和最后一天取样。表皮碳氢化合物采用气相色谱-质谱法进行定性定量分析,采用Excel2010、SPSS16.0和SIMCA13.0.3进行数据分析,采用GraphPadPrism5作图。 1.应用SIMCA-P软件,对各温湿度条件下幼期表皮碳氢化合物的组成进行主成分分析和偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)。结果表明:表皮碳氢化合物的组成随虫龄增长可发生显著的时序性变化,在取食期后期和离食期发生的变化最明显;温度及土壤湿度对其有显著影响。 2.绯颜裸金蝇幼期表皮碳氢化合物的主要成分是直链烷烃、单甲基烷烃、双甲基烷烃、烯烃,及一些未知成分,其碳链长度为21-36,其中直链烷烃含量最多,且以奇数碳为主,其次是支链烷烃,烯烃的含量最少。 3.表皮碳氢化合物的时序性变化有显著的规律:即低分子量和支链烷烃(特别是2-甲基烷烃)的百分含量随虫龄增长而减少;高分子量烷烃和直链烷烃的含量,随着虫龄的增长而增加。 4.环境温度和土壤湿度对表皮碳氢化合物的组成有显著影响。高温或低土壤湿度下,高分子量物质或直链烷烃的含量增加。相反,低温或高土壤湿度下,高分子量物质或直链烷烃的含量减少。 绯颜裸金蝇幼虫表皮碳氢化合物的组成有显著的时序性变化规律,在虫龄推断中有较大的应用潜力;环境温度和土壤湿度对其有显著影响。表皮碳氢化合物用于蝇类幼虫日龄推断时,必须考虑环境温湿度的影响,有待于深入研究。